[发明专利]肝移植中HLA-C1/C2基因PCR-SSP快速鉴定方法在审
| 申请号： | 201810591798.X | 申请日： | 2018-06-08 |
| 公开（公告）号： | CN108796050A | 公开（公告）日： | 2018-11-13 |
| 发明（设计）人： | 邓志辉;陈瑞 | 申请（专利权）人： | 深圳市血液中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12Q1/6883 |
| 代理公司： | 深圳市世纪恒程知识产权代理事务所 44287 | 代理人： | 胡海国;邵柱 |
| 地址： | 518000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 特异性PCR引物 肝移植 扩增 引物 基因 单核苷酸多态性 琼脂糖电泳检测 特异性PCR扩增 退火 特异性引物 位点特异性 等位基因 贵重设备 基因分型 急性排斥 快速检测 快速鉴定 扩增产物 全长序列 实验操作 同步扩增 序列特征 供体 配组 判定 数据库 直观 移植 清晰 | ||
1.肝移植中HLA-C1/C2基因PCR-SSP快速鉴定方法，其特征在于：采用一条HLA-C基因特异性PCR扩增引物，分别与一条针对HLA-C1的组特异性PCR引物、一条针对HLA-C2的组特异性PCR引物配组，在同一PCR扩增条件下分别特异性扩增HLA-C1及HLA-C2基因；
所述HLA-C1基因特异性PCR扩增引物包括：上游引物HLA-C-F2和下游引物HLA-C1-RD，其中，所述上游引物HLA-C-F2的序列为：5'-CCAATCAGCGTCTMCGCAGTC-3'，位于5’-启动子区域，在HLA-C基因组全长序列中的位置为：nt-77～nt-57；所述下游引物HLA-C1-RD的序列为：5'-TCTGGTTGTAGTAGCCGCGCAGG-3'，位于第2外显子，在HLA-C基因组全长序列中的位置为：nt442～nt464；
所述HLA-C2基因特异性PCR扩增引物包括上游引物HLA-C-F2和下游引物HLA-C2-RB，其中，所述上游引物HLA-C-F2的序列为：5'-CCAATCAGCGTCTMCGCAGTC-3'，位于5’-启动子区域，在HLA-C基因组全长序列中的位置为：nt-77～nt-57；所述下游引物HLA-C2-RB的序列为：5'-TCTGGTTGTAGTAGCCGCGCAGT-3'，位于第2外显子，在HLA-C基因组全长序列中的位置为：nt442～nt464。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述HLA-C1基因的特异性PCR扩增产物涵盖了部分5’-启动子区、第1外显子、第1内含子以及部分第2外显子序列，目的片段长度为541bp；
所述HLA-C2基因的特异性PCR扩增产物涵盖了部分5’-启动子区、第1外显子、第1内含子以及部分第2外显子，目的片段长度为541bp。
3.如权利要求1、2所述的方法，其特征在于，所述HLA-C1及HLA-C2的PCR扩增反应体系均为：
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，PCR扩增条件均为：
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