[发明专利]一种筛选CREB信号通路激动剂或抑制剂的方法

权利要求书

1.一种CREB信号通路双荧光素酶报告基因载体，其特征在于，包括萤火虫荧光素酶报告基因和HTLV-1病毒LTR区域序列片段，所述HTLV-1病毒LTR区域序列片段位于萤火虫荧光素酶报告基因上游且被CREB蛋白激活后能够启动萤火虫荧光素酶报告基因表达。

2.如权利要求1所述的CREB信号通路双荧光素酶报告基因载体，其特征在于，所述HTLV-1病毒LTR区域序列片段的序列如SEQ ID No.1所示。

3.如权利要求1所述的CREB信号通路双荧光素酶报告基因载体，其特征在于，序列如SEQ ID No.2所示。

4.一种筛选CREB信号通路激动剂或抑制剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将如权利要求1～3任一所述CREB信号通路双荧光素酶报告基因载体和内参载体、阳性对照载体同时转染细胞后培养，所述内参载体包含可持续稳定表达的海肾荧光素酶报告基因，所述阳性对照载体包含表达产物能够激活CREB信号通路的tax基因；

(2)向细胞培养基中加入待筛选物质后继续培养；

(3)检测各细胞组的荧光素酶活性，若加入待筛选物质的细胞组荧光素酶活性比未加待筛选物质的细胞组强，则该待筛选物质为CREB信号通路激动剂；若加入待筛选物质的细胞组荧光素酶活性比未加待筛选物质的细胞组弱，则该待筛选物质为CREB信号通路抑制剂。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述内参载体为pRL-CMV，序列如SEQ IDNo.3所示。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述阳性对照载体为pcDNA3.1-Tax，序列如SEQ ID No.4所示。

7.岩藻多糖作为CREB信号通路抑制剂的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述岩藻多糖的使用浓度为1μg/mL–1mg/mL。