[发明专利]一种检测广佛手8种真菌毒素的方法

权利要求书

1.一种测定广佛手8种真菌毒素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

一.溶液的配制

混合内标溶液的制备：用乙腈配制¹³C₃₄-FB1、¹³C₂₀-OTA、¹³C₁₈-ZEN这三种内标的混合内标溶液；

供试品溶液的制备：将广佛手样品研细混匀，加甲醇-甲酸-水，加入¹³C₁₇-AFB1和混内标溶液混匀，超声离心处理，吸取上清液于35～42℃氮气吹干，甲醇水溶液复溶，过滤膜，得供试品溶液；

对照品溶液制备：用甲醇制备不同浓度的OTA，乙腈制备不同浓度的FB1、ZEN、ST、AFB1、AFB2、AFG1、AFG2混合标准溶液，按照供试品溶液的制备方法，得到系列不同浓度的对照品溶液；

二.测定

将上述制备的供试品溶液和对照品溶液进行LC-MS/MS检测。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备步骤为：

称取0.50～1.50g广佛手样品研细混匀，加3～4mL甲醇-甲酸-水，加入1～5uL的¹³C₁₇-AFB1和混内标溶液混匀，超声离心处理，吸取1～2mL上清液于35～42℃氮气吹干，加入250～750μL甲醇-水溶液复溶，过滤膜，得供试品溶液。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对照品溶液的制备步骤为：

称取OTA、ZEN、FB1、ST、AFB1、AFG1、AFB2、AFG2共同混匀稀释成标准中间液，吸取标准中间液用乙腈配制出浓度分别为100ng/mL、500ng/mL、500ng/mL、500ng/mL、100ng/mL、100ng/mL、33ng/mL和33ng/mL的混合对照品溶液，分别取不同浓度的混合标准溶液1mL，按照供试品溶液的制备方法，得到系列不同浓度的对照品溶液。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的供试品溶液的制备中，甲酸-甲醇-水的体积比为1:75～80:15～25。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的供试品溶液的制备中，¹³C₁₇-AFB1和混内标C体积比为1:1～4。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的供试品溶液的制备中，离心的条件为3～5℃、8000～12000r/min，离心时间为8～13min。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，LC-MS/MS测定过程中，所述的梯度洗脱的程序为：

其中液相色谱的流动相A为0.1～0.3％甲酸水溶液，流动相B为0.1～0.3％甲酸乙腈。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的MS检测条件为：使用电喷雾离子源；离子源参数为：碰撞气压力：9psi；气帘气压力：40psi；正负离子同时扫描模式；离子源温度550℃。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的MS检测参数如下表所示：

表中*为定量离子。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，检测过程中，还设置空白样品对照组，空白样品对照组除不加广佛手样品外，其余操作均同供试品溶液的操作。