[发明专利]一种基于体外红细胞模型精准评价抗氧化健康效益的方法

说明书

本发明公开了一种基于体外红细胞模型精准评价抗氧化健康效益的方法，包括以下步骤：(1)体外红细胞的制备；(2)分组、氧化应激诱导及供试品给药处理，建立模型组、空白对照组及供试组，孵育后离心收集红细胞；(3)测定上述各组的红细胞溶血率，并测量其中的辅酶浓度；(4)各组体外红细胞的IPDR值计算；(5)供试品的健康效益判别。本发明通过对该评价方法整体的方法流程设置，以及作为重要判定依据的辅酶种类等进行改进，与现有技术相比，可针对内源氧化‑还原网络的关键节点，在考虑外源抗氧化剂的细胞生理响应的情况下，综合外源抗氧化剂对细胞氧化‑还原平衡及细胞代谢的影响，从而得出能够全面反应被测物质抗氧化健康效益的HI值。

技术领域

本发明属于食品、药品药效及副作用评估技术领域，更具体地，涉及一种基于体外红细胞模型精准评价抗氧化健康效益的方法，该方法尤其可用于评价天然产物的抗氧化健康效益。

背景技术

当前“大健康”领域中，越来越提倡通过各种非药物途径预防慢性疾病，进一步提高生命质量、及延缓衰老，其中通过健康饮食的生活方式干预是其中最重要的途径之一。健康饮食既包括蔬菜水果为主的所谓“生机饮食”，也包括流传久远的中医食疗文化，既涉及疾病人群、也涉及广大的亚健康人群，相关领域的科学研究正得到极大的关注。但饮食如何改善健康？确实是一直以来的健康大命题。“健康食品”一般富含天然抗氧化成分，九成以上的健康食品通过体外检测具有“抗氧化”作用，但由于缺乏有效的评价方法，人们对这些“天然抗氧化剂”的体内健康效益及其作用的精确靶点或途径尚缺乏有效的认识，这也是导致目前民众对功能食品的接受度和认知度比较低的主要科技方面的原因。

氧化-还原的平衡是生命体维持正常新陈代谢、能量平衡及机体免疫的基础。目前评价膳食抗氧化剂健康效益基本上是基于“衰老及慢性病的自由基学说”，对提取物或单一成分进行抗氧化活性评价。常用的方法主要有体外的直接化学抗氧化测定和整体动物血液或肝脏抗氧化酶活性分析法。也有在前者的基础上，用体外肝癌细胞(例如HeGp2)或者红细胞做模型，考察抗氧化剂对化学自由基引发剂所产生的活性氧自由基(ROS)的清除及对细胞膜的保护能力，但这些方法要么未考虑外源抗氧化剂的细胞生理响应，要么未能针对内源氧化-还原网络的关键节点，因而不能代表外源抗氧化剂对细胞氧化-还原平衡及细胞代谢的影响，因而很难代表所测物质的健康效益。

发明内容

针对现有技术的以上缺陷或改进需求，本发明的目的在于提供一种基于体外红细胞模型精准评价抗氧化效益的方法，其中通过对评价整体的方法流程设置，以及作为重要判定依据的辅酶种类等进行改进，与现有技术相比，可针对内源氧化-还原网络的关键节点，在考虑外源抗氧化剂的细胞生理响应的情况下，综合外源抗氧化剂对细胞氧化-还原平衡及细胞代谢的影响，从而得出能够全面反应被测物质(如膳食提取物、膳食成分、药品提取物或药品成分)其抗氧化健康效益的HI值。

为实现上述目的，按照本发明，提供了一种基于体外红细胞模型精准评价抗氧化健康效益的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)体外红细胞的制备：采集哺乳动物静脉血离心收集压积红细胞，将压积红细胞定量悬浮到红细胞等渗溶液稀释得到含红细胞8％-15％(V/V)的红细胞悬液；

(2)分组、氧化应激诱导及供试品给药处理：

分组具体是将所述红细胞悬液分为三组，并对它们进行氧化应激诱导及供试品给药处理从而得到模型组、空白对照组及供试组共三组，其中，

所述模型组具体是向红细胞悬液中加入红细胞氧化应激诱导剂，该红细胞氧化应激诱导剂为诱导剂与红细胞等渗溶液的混合物；

所述空白对照组具体是向红细胞悬液中仅加入红细胞等渗溶液；

所述供试组具体是向红细胞悬液中加入供试品与所述红细胞氧化应激诱导剂的混合物，所述供试品包括膳食提取物、经过纯化后的膳食单一抗氧化成分、或天然药物提取物中的至少一种；