[发明专利]特异性检测氰根的试剂及其合成方法和应用在审
申请号: | 201810611768.0 | 申请日: | 2018-06-14 |
公开(公告)号: | CN109053778A | 公开(公告)日: | 2018-12-21 |
发明(设计)人: | 阴彩霞;康锦;范建风;赵三虎 | 申请(专利权)人: | 忻州师范学院 |
主分类号: | C07F5/02 | 分类号: | C07F5/02;C09K11/06;G01N21/64 |
代理公司: | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人: | 宋平 |
地址: | 034000 *** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 氰根 种特异性 检测 合成 荧光分光光度计 甲氧基苯基 特异性检测 定量检测 检测结果 二甲基 三甲基 乙烯基 硼砂 乙基 吡咯 吲哚 应用 灵敏 | ||
1.一种氟硼二吡咯(BODIPY)衍生物,其特征在于,结构式为:
2.根据权利要求1所述的氟硼二吡咯(BODIPY)衍生物的合成方法,包括以下步骤:
将摩尔比为1:2的对甲氧基苯甲醛和2,4-二甲基吡咯溶于无水二氯胺,再加三氟乙酸(TFA),搅拌混合物,之后加入二氯二氰基苯醌并继续搅拌,然后加入三乙胺,后滴加三氟化硼乙醚,反应得到粗产物;
所述粗产物通过柱色谱法纯化以获得第一化合物;
向所述第一化合物在四氢呋喃(THF)/水中的溶液中滴加二氯二氰基苯醌溶液,其中四氢呋喃与水的体积比为100:1,在氩气保护下,将溶液在0℃下储存4小时后,将反应混合物的温度缓慢升至室温,将反应混合物放置过夜,通过加入水骤冷,所得混合物用二氯甲烷萃取并用水洗涤,使用柱色谱法进一步纯化,用乙酸乙酯/石油醚的混合物洗脱得到第二化合物,其中乙酸乙酯与石油醚的体积比为1:6;
将第二化合物和1,3,3-三甲基-3H-吲哚鎓盐溶于苯中,在氩气保护下搅拌并回流,反应后,过滤,用乙醇洗涤,干燥得到黑色固体,为氟硼二吡咯(BODIPY)衍生物。
3.根据权利要求1所述的氟硼二吡咯(BODIPY)衍生物在氰根检测中的应用。
4.一种检测氰根的方法,包括以下步骤:
(1)、配制pH=7.4、浓度为10mM的PBS缓冲溶液,并用二甲基亚砜配制2mM(E)-2-(2-(5,5-二氟-10-(4-甲氧基苯基)-1,7,9三甲基-5H-4λ4,5λ4二吡咯并[1,2-C:2',1'-f][1,3,2]二氮杂硼砂-3-基)乙烯基)-1-乙基-3,3-二甲基-3H-吲哚-1-鎓的二甲基亚砜溶液;
(2)、按体积比1:1将PBS缓冲溶液和乙腈溶液加到2mL荧光比色皿中,在荧光分光光度仪上检测,随着待测样的加入,646nm处的荧光强度的逐渐降低,伴随着542nm荧光强度显著增强;
(3)、用蒸馏水配制20mM的氰根溶液,按体积比1:1将PBS缓冲溶液和乙腈溶液加到2mL荧光比色皿中,逐渐加入氰根溶液的体积为0、3、6、9、12、15、18μL,同时在荧光光谱仪上测定542nm处与646nm处相对荧光强度的比值I542/I646为0.705、1.970、4.134、11.263、32.964、76.852、97.833,以氰根浓度为横坐标,以相对荧光强度比值I542/I646为纵坐标绘制图,得到氰根浓度c的工作曲线;线性回归方程为:F542/F646=2.45c+1.25,c的单位为10-5mol/L;
(4)、测定样品溶液时,将测得的荧光强度代入线性回归方程,即可求得氰根浓度c。
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