[发明专利]一种体外扩增人外周血CD3+T细胞的方法在审
| 申请号： | 201810615865.7 | 申请日： | 2018-06-14 |
| 公开（公告）号： | CN108753716A | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 高基民;钱文斌 | 申请（专利权）人： | 杭州启澜生物医学技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 黄欢娣;邱启旺 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市滨*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 双功能融合蛋白 链亲和素 人外周血 磁珠 扩增 锚定 外扩 激活T细胞 磁珠表面 固相表面 免疫治疗 桥联作用 生物素化 受体聚集 细胞因子 生物素 成簇 可用 体外 修饰 种体 制备 | ||
【权利要求书】：
1.一种体外扩增人外周血CD3+T细胞的方法，其特征在于，利用锚接有hIL2、hIL7和hIL21细胞因子的磁珠的固相表面将CD3+T细胞表面的细胞因子受体聚集成簇，激活T细胞，实现T细胞的高效扩增。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，hIL2、hIL7和hIL21在磁珠表面的锚定是通过以下手段实现的：借助生物素与链亲和素的桥联作用将SA‐hIL2、SA‐hIL7和SA‐hIL21双功能融合蛋白共同锚定在已生物素化的磁珠表面。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述双功能融合蛋白纯度均达90％以上。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，SA‐hIL2、SA‐hIL7和SA‐hIL21在磁珠表面的锚定剂量比4.5:2:1。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以一定浓度的磁珠激活T细胞，其中，锚定于磁珠表面的SA‐hIL2的浓度为200U。
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