[发明专利]一种间充质干细胞成软骨诱导分化培养基

权利要求书

1.一种应用于间充质干细胞在立体空间成软骨诱导分化培养基，其包含0.1-5％的蛋白混合物、50-500μM抗坏血酸、0.8-8mM脯氨酸、50-500nM地塞米松和5-50ng/mL转化生长因子2型。

2.根据权利要求1所述的诱导分化培养基，其中蛋白混合物包含0.1-2mg/mL的转铁蛋白、0.1-1mg/mL的胰岛素和0.1-2μg/mL亚硒酸钠。

3.根据权利要求1-2所述的诱导分化培养基，其中蛋白混合物中的转铁蛋白浓度为约0.1mg/mL至约2mg/mL，如约1mg/mL。

4.根据权利要求1-2所述的诱导分化培养基，其中蛋白混合物中的胰岛素浓度为约0.1mg/mL至约1mg/mL，如约0.5mg/mL。

5.根据权利要求1-2所述的诱导分化培养基，其中蛋白混合物中的亚硒酸钠浓度为约0.1μg/mL至约1μg/mL，如约0.7μg/mL。

6.根据权利要求1所述的诱导分化培养基，其中抗坏血酸的浓度为约50μM至约500μM，如约300μM。

7.根据权利要求1所述的诱导分化培养基，其中脯氨酸的浓度为约0.8mM至约8mM，如约4mM。

8.根据权利要求1所述的诱导分化培养基，其中地塞米松的浓度为约50nM至约500nM，如约100nM。

9.根据权利要求1所述的诱导分化培养基，其中转化生长因子2型为约5ng/mL至约50ng/mL，如约10ng/mL。

10.根据前述权利要求中任一项的培养基，其中所述培养基还含以下一种或多种：无机盐、氨基酸、维生素、抗生素和能量源等。

11.间充质干细胞往成软骨方向诱导的方法，所述方法包括在根据权利要求1-10中任一项的培养基诱导处理间充质干细胞。

12.在体外三维培养间充质干细胞诱导为软骨，能容纳高密度细胞群落，模拟胚胎体内软骨发育的过程，细胞外基质也可良好地固定在细胞群外，增强细胞之间的粘附和增殖，三维软骨形式所述方法，包括在根据权利要求1-10中任一项的培养基培养和诱导分化间充质干细胞。

13.根据权利要求2-5所述的诱导分化培养基的用途，可在体外提供间充质干细胞所需的营养，在无血清的条件下改善其生长速率，并改善细胞凋亡的程度。

14.根据权利要求6-7所述的诱导分化培养基的用途，可促进细胞分泌的基质有机排列和组合，改善内外源活性因子的传递，改善活性物质的储存和排泄。

15.根据权利要求6-7所述的诱导分化培养基的用途，促进细胞间的密切接触，促进自分泌和旁分泌作用，促进细胞发生转化。

16.根据权利要求8-9所述的诱导分化培养基的用途，促进未分化干细胞进行分化，促进软骨细胞基质的合成和分泌，促进软骨前体细胞的凝聚。

17.根据权利要求10所述的诱导分化培养基的用途，提供细胞培养的基础营养，促进权利要求2-9所述诱导分化培养基的效率。

18.根据权利要求11-17所述的诱导分化培养基的方法或用途，其中所述间充质干细胞为哺乳类动物间充质干细胞，如人、兔子和大鼠等。

19.根据权利要求11-17所述的诱导分化培养基的方法或用途，其中所述间充质干细胞可来源于动物体的骨髓、脂肪、牙髓和皮肤等，如骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、表皮干细胞等。

20.根据权利要求11-17所述的诱导分化培养基的方法或用途，其中所述间充质干细胞在具有5-10％之间的二氧化碳含量的环境下处理和/或培养所述间充质干细胞。