[发明专利]一种肾病综合征大鼠模型的构建及评价方法

说明书

本发明属模型的构建及评价方法技术领域，为解决现有肾病综合征模型的构建与评价方法存在灵敏度低、准确性差的问题，提供一种肾病综合征大鼠模型的构建及评价方法。用代谢组学技术，分析造模前后机体终端产物尿液中内源性代谢产物的变化，MestReNova软件对所有的¹H NMR谱进行处理得到积分数据，结合12个生物标志物的含量统计学分析，造模前后尿液中的12个生物标志物积分均值的变化反应了肾病综合征大鼠尿液代谢物含量的变化趋势，针对性地评价肾病综合征的模型。全面灵敏、系统综合的体现造模前后机体动态轮廓，综合地体现模型复制的合理性和科学性，为新药研发和药理研究提供可靠的评价方法，高效、快速、无创伤、特异性强。

技术领域

本发明属于模型的构建及评价方法技术领域，具体涉及一种肾病综合征大鼠模型的构建及评价方法。

背景技术

肾病综合征是由于各种病因导致的肾小球滤过膜通透性发生改变的一个症候群，大量蛋白尿是其主要特点和诱因，且肾病综合征为儿童多发难治性疾病，发病率髙达2~10/100000，为仅次于急性肾小球肾炎的第二大肾脏疾病，严重影响人类健康。

目前肾病综合征模型复制成功与否的判断主要根据24 h尿蛋白定量、肾组织病理学检查和血清生化指标。血清SOD和MDA水平，肾组织炎症因子、纤维化因子水平以及肾脏足细胞结构蛋白表达水平等机制相关检查指标也被大量研究者检测。但长期以来的实验研究中，肾病综合征模型评价仍存在不足之处。（1）主观性：肾组织形态直接观察指标包括肾小球结构状态，肾小管及肾间质是否存在肿胀，以及是否存在大量的蛋白管型及透明管型等，这种评价方法采取主观人为评价，存在很大的主观性和不确定性。（2）片面性：通过肾病综合征相关调控因子评价模型存在一定的片面性，只能反映个别的生化功能，器官/组织的状态，缺乏整体的系统的评价标准。（3）灵敏度和专属差：各血清生化指标如血尿素氮（BUN）和肌酐（Scr）均属于晚期肾病标志物，难以灵敏反映肾脏早期的功能损害；且几乎所有肾脏疾病包括肾病综合征、肾炎、肾衰等该指标均发生改变，不具备专属性。

发明内容

本发明为了解决现有肾病综合征模型的构建与评价方法存在灵敏度低、准确性差的技术问题，提供一种肾病综合征大鼠模型的构建及评价方法。

本发明由如下技术方案实现的：一种肾病综合征大鼠模型的构建方法，建立肾病综合征大鼠模型，造模前后机体终端产物尿液进行核磁共振分析，得出大鼠模型的¹H NMR谱图，分析造模前后机体尿液中内源性代谢产物的变化，使用MestReNova软件对所有的¹HNMR谱进行处理得到积分数据，然后对大鼠模型的¹H NMR谱图积分数据矩阵进行多元统计分析，得出大鼠模型的轮廓图；进而采用主成分分析PCA对数据进行模式识别，对大鼠模型的轮廓图进行轮廓动态分析，得出大鼠模型的轮廓动态变化趋势图；得出12个生物标志物的含量变化，12个生物标志物为：Succinate、2-Ketoglutarate、Citrate、Butyrate、Glutamate、Creatinine、Glycine、Phenylalanine、Leucine、Glutamine、Dimethyglycine和Phosphocholine；结合12个生物标志物的含量统计学分析，若模型大鼠尿液中：Succinate的积分面积均数从正常鼠的1.645±0.1994下降到1.034±0.1221，p＜0.001；

2-Ketoglutarate的积分面积均数从正常鼠的1.241±0.2483下降到0.849±0.1193，p＜0.01；

Citrate的积分面积均数从正常鼠的2.403±0.2064下降到1.738±0.3011，p＜0.001；

Butyrate的积分面积均数从正常鼠的0.3832±0.03736下降到0.3401±0.06030，p＜0.05；