[发明专利]一种透明质酸修饰的阳离子类脂质体、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种透明质酸修饰的包载基因的阳离子类脂质体，其特征在于，其以非离子表面活性剂、辅助磷脂和阳离子磷脂为主要成膜材料，外层包裹修饰透明质酸；其中，非离子表面活性剂为吐温80或司盘80，辅助磷脂为角鲨烯或胆固醇；所述透明质酸修饰的包载基因的阳离子类脂质体的粒径为100-300nm，Zeta电位为-5～-80mV；

非离子表面活性剂和辅助磷脂摩尔比为5:2～5:8，阳离子磷脂和非离子表面活性剂的质量比为7:100～13:100；

辅助磷脂能够起到一定的支撑作用，对于形成双分子层具有一定的辅助能力，加入阳离子磷脂，使得电位从负转正，特异性地结合负电性的基因，通过静电吸附实现包裹，最终形成的阳离子类脂质体实现基因包载；

所述包载基因为治疗眼底病的负电性基因；

所述阳离子磷脂为2,3-二油酰基-丙基-三甲胺。

2.如权利要求1所述的一种透明质酸修饰的包载基因的阳离子类脂质体的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)将非离子表面活性剂、辅助磷脂、阳离子磷脂混合，完全溶解在无水乙醇中；

(2)将乙醇溶液匀速注入到温度为40-80℃的缓冲盐溶液中，并搅拌30-50nin，再于超滤膜下超滤1-3次，得到阳离子类脂质体；

(3)将负电荷的基因与正电荷的阳离子类脂质体混合涡旋200S，室温静置；

(4)将透明质酸-二油酰磷脂酰乙醇胺加入到步骤(3)得到的产物中，37℃孵育20-40min，得到透明质酸修饰的阳离子类脂质体。

3.根据权利要求2所述的一种透明质酸修饰的包载基因的阳离子类脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，透明质酸的分子量范围为500-3900kDa。

4.根据权利要求2所述的一种透明质酸修饰的包载基因的阳离子类脂质体的制备方法，其特征在于，透明质酸-二油酰磷脂酰乙醇胺与阳离子类脂质体的质量比为1：10-1：5。

5.一种如权利要求1所述的透明质酸修饰的包载基因的阳离子类脂质体在制备眼部基因递送载体中的应用。