[发明专利]一种副鸡禽杆菌的血凝抑制抗原的制备方法及抗原的应用

权利要求书

1.一种副鸡禽杆菌血凝抑制抗原的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：

S1、培养副鸡禽杆菌获得菌液；

S2、将副鸡禽杆菌菌液离心并用PBS洗涤沉淀，之后用PBS稀释获得副鸡禽杆菌PBS悬浮液，加入猪葡萄球菌滤液，混匀，在37℃震荡1.5～3小时，再4℃作用24～48小时；

S3、步骤S2处理后的溶液经离心取沉淀后，用PBS洗涤、稀释，然后冰浴中超声波裂解，之后用100目的金属过滤器过滤留滤液，获得副鸡禽杆菌血凝抑制抗原。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤S1中，所述菌液的OD₆₀₀值≥0.9；在步骤S2中，所述离心的速率采用8000×g，离心10min，100mL菌液离心的沉淀用20～30mL PBS悬浮。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤S2中，所述猪葡萄球菌滤液为猪葡萄球菌在LB液体培养基中过夜培养后，待OD₆₀₀值≥1.0收获菌液，离心取上清液，用0.22μm滤器过滤后的液体；所述猪葡萄球菌滤液的加入量为所述副鸡禽杆菌PBS悬浮液体积的10％～20％。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述超声波裂解的功率为600W，作用1s，间隔2s，共裂解10min。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将所述副鸡禽杆菌血凝抑制抗原中加有抗原稳定剂，所述抗原稳定剂中含终浓度中按体积百分比为3.5％的甘油，含终浓度按质量百分比为2.5％的多胨和1％的甘氨酸。

6.一种含有根据权利要求1-5中任一所述制备方法制备获得的副鸡禽杆菌血凝抑制抗原的检测试剂或检测试剂盒。

7.权利要求1-5中任一所述制备方法制备获得的副鸡禽杆菌血凝抑制抗原在制备检测鸡副鸡禽杆菌抗体的检测试剂或检测试剂盒中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述副鸡禽杆菌血凝抑制抗原用于鸡副鸡禽杆菌抗体的血凝抑制试验时，所述副鸡禽杆菌血凝抑制抗原添加有牛血清白蛋白V，在醛化红血球PBS稀释液中添加有tween-20以及牛血清白蛋白V。