[发明专利]一种羰基还原酶突变体及其编码基因和应用在审
申请号: | 201810623389.3 | 申请日: | 2018-06-15 |
公开(公告)号: | CN108624605A | 公开(公告)日: | 2018-10-09 |
发明(设计)人: | 陈本顺;常斌;陈峻青;武涛;石利平;徐春涛;刘靖;朱伟伟;杨莹;陈晓佩 | 申请(专利权)人: | 宿迁阿尔法科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N9/04;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/62;C12P7/02;C12R1/19 |
代理公司: | 南京思拓知识产权代理事务所(普通合伙) 32288 | 代理人: | 吕鹏涛 |
地址: | 223800 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 羰基还原酶 制备 突变体 基因工程菌 编码基因 重组表达 不对称催化合成 羰基类化合物 氨基酸序列 不对称还原 突变体基因 苯基丁酸 光学活性 还原产物 手性醇 催化剂 底物 乙酯 羟基 应用 基因 生产 | ||
1.一种羰基还原酶突变体基因,其特征在于核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.权利要求1所述的羰基还原酶基因编码的羰基还原酶,其特征在于氨基酸序列如SEQID NO.2所示。
3.含有权利要求1所述的羰基还原酶突变体基因的重组表达载体。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体,其特征在于载体系统为pET-24a。
5.一种生产权利要求2所述的羰基还原酶突变体的基因工程菌,其特征在于所述基因工程菌中包含权利要求1所述的羰基还原酶突变体基因。
6.根据权利要求5所述的基因工程菌,其特征在于所述基因工程菌的宿主细胞为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)BL21(DE3)。
7.一种权利要求2所述的羰基还原酶突变体的制备方法,其特征在于包括如下步骤:培养权利要求5或6所述的基因工程菌,获得重组表达的羰基还原酶。
8.根据权利要求7所述的制备方法,其发酵罐培养的发酵条件是:溶氧35-45%,空气流量1:1.5vvm。
9.权利要求1所述的羰基还原酶突变体在催化制备手性醇中的应用,其特征在于以权利要求2所述的羰基还原酶为催化剂不对称还原羰基类化合物制备光学活性手性醇。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于以权利要求2所述的羰基还原酶为催化剂催化还原2-氧代-4-苯基丁酸乙酯制备(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯。
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