[发明专利]一种用细菌发光速测肝脏疾病的试剂盒及其用法

权利要求书

1.一种用细菌发光速测肝脏疾病的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括提纯防干扰液、发光细菌、发光细菌培养液、效果稳定剂，所述提纯防干扰液由乙醇和十二烷基硫酸钠构成，所述发光细菌为青海弧菌Q67，所述发光细菌培养液由酵母浸出液0 .8 g、胰蛋白胨0.8 g、甘油0 .3 g、NaCl 3 g、Na2HPO4 0 .8 g、KH2PO4 0 .8g和蒸馏水100 mL构成，所述效果稳定剂为含有1.8 wt .%NaCl溶液。

2.一种权利要求1所述的用细菌发光速测肝脏疾病的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一.取试剂盒待测的血清样品进行预处理：在待检测血清区域中采用随机多点取样法选取采样点，采集中上层血清内的血样后，将血样混合均匀，置于血清袋后在室温下阴凉处降温，去除表层血脂，排空气后于室温避光保存备用；

步骤二.用所述提纯防干扰液对步骤一中的样品进行提纯防干扰处理：称取步骤一制备的血样，过滤膜后用乙醇索氏提取，离心旋转沉淀，加入十二烷基硫酸钠后将该混合物继续离心沉淀备用；

步骤三.对提纯防干扰处理后的样品用所述发光细菌进行感染病毒检测：取加入发光细菌后的发光细菌培养液，加入步骤二中的样品、1.8 wt .%NaCl溶液和纯净水，混匀后静置，测定发光强度衰减；

步骤四.样品感染病毒的结果算法：测量步骤三静置后混合液的发光强度衰减算出样品的感染程度。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤一选取8个采样点。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤二中称取3~8g步骤一制备的血样，过2 mm滤膜后用乙醇索氏提取16 h，离心旋转沉淀至8 mL，加入3~8 mL十二烷基硫酸钠，然后将混合物继续离心沉淀至8 mL备用。

5.根据权利要求2所述的法，其特征在于，所述步骤三培养后的发光细菌培养液、样品提纯防干扰液、1.8 wt .%NaCl溶液和纯净水的体积比为1：2：4：13。

6.根据权利要求5所述的的方法，其特征在于，所述步骤三取80 μL培养后的发光细菌培养液，加入100 μL样品提纯防干扰液、200 μL 1.8 wt .% NaCl和680 μL纯净水。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤三中培养后的发光细菌培养液的制备过程如下：取发光细菌培养液和蒸馏水100 mL混合均匀，调节p H值至6 .8~7 .0；第一代斜面菌种在20℃温度下培养24 h后，立即接入第二代斜面培养12h后备用；将上述菌龄满12 h的新鲜斜面菌体接入盛有80 mL培养液的三角瓶中，接种量不超过1环，20 ℃、210 r/min振荡培养，每2 h测定1次培养液发光强度衰减。

8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤三中取培养16~18 h后的发光细菌培养液。

9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤三中混匀后静置1.8 min。

10.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤四中通过HQ-51型生物感染病毒测试仪检处理后测待的样品对对发光细菌的发光强度衰减。