[发明专利]一种炒青绿茶中吡嗪类化合物的检测方法

权利要求书

1.一种炒青绿茶中吡嗪类化合物的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)配置一系列不同浓度的2-甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪、2-乙基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、2-乙基-6-甲基吡嗪、3-乙基-2,5-二甲基吡嗪和2,3-二乙基-5-甲基吡嗪的混合标准工作液，加入“空白基质样品”中，进行GC-QqQ-MS/MS分析，在多反应监测模式下进行检测，并绘制色谱峰面积与对应吡嗪类化合物浓度的标准工作曲线；

(2)红外辅助顶空固相微萃取提取炒青绿茶中的吡嗪类化合物，与步骤(1)相同的GC-QqQ-MS/MS条件下进行分析，然后将待测目标物的峰面积代入对应标准曲线中计算即得待测样中目标物的浓度；

红外辅助顶空固相微萃取包括如下步骤：

将炒青绿茶置于顶空瓶中，加入蒸馏水和乙醇，密封帽密封；采用红外灯辅助加热样品，将固相微萃取针刺穿密封帽隔膜然后推出萃取纤维头于顶空瓶上方进行吸附；萃取完成后，拔出固相微萃取针插入GC进样口，热解析后进行GC-QqQ-MS/MS分析；

所述萃取纤维头为75μm Carboxen/聚二甲基硅氧烷；吸附时间为14～16min；红外功率为140～160W；

炒青绿茶、蒸馏水和乙醇的质量体积比为0.5g：1800～1900μl：200～100μl；热解析条件为270℃下解析5min；

色谱分离条件为：

色谱柱VF-WAXms,260℃，30m×250μm×0.25μm；程序升温：初始柱温60℃，保持5min，以3℃/min升120℃，保持2min，然后再以30℃/min升至240℃，保持0min；载气：氦气，纯度99.999％；载气流速：1.0mL/min；N₂碰撞气流速1.5mL/min；进样方式：分流比50:1；

质谱条件中各目标物的母离子、定性离子、定量离子、定性离子碰撞能量以及定量离子碰撞能量分别为：

2-甲基吡嗪：母离子94m/z、定性离子对94→67m/z、定量离子对94→53m/z、定性离子碰撞能量10eV、定量离子碰撞能量10eV；

2,5-二甲基吡嗪：母离子108m/z、定性离子对108→54m/z、定量离子对108→81m/z、定性离子碰撞能量20eV、定量离子碰撞能量10eV；

2-乙基吡嗪：母离子107m/z、定性离子对107→52m/z、定量离子107→79m/z、定性离子碰撞能量25eV、定量离子碰撞能量25eV；

2,3-二甲基吡嗪：母离子108m/z、定性离子对108→67m/z、定量离子对108→93m/z、定性离子碰撞能量10eV、定量离子碰撞能量10eV；

2-乙基-6-甲基吡嗪：母离子121m/z、定性离子对121→53m/z、定量离子对121→66m/z、定性离子碰撞能量20eV、定量离子碰撞能量20eV；

3-乙基-2,5-二甲基吡嗪：母离子135m/z、定性离子对135→107m/z、定量离子对135→80m/z、定性离子碰撞能量10eV、定量离子碰撞能量20eV；

2,3-二乙基-5-甲基吡嗪：母离子150m/z、定性离子对150→135m/z、定量离子对150→121m/z、定性离子碰撞能量10eV、定量离子碰撞能量20eV；

余下质谱参数：传输线温度：280℃；离子源温度280℃；溶剂延迟：5min；电离方式：EI源；电离能量：70eV；Q2碰撞气：纯度≥99.999％的氮气；

采用标准加入法进行定量分析：在建立的最优的红外辅助顶空固相微萃取条件下，将10个不同系列浓度的标准溶液分别加入“空白基质样品”中，根据所选的特征定量离子的峰面积和相应的标准浓度，进行线性回归分析，得到标准工作曲线，在相同的条件下，通过将待测样品中目标挥发物的峰面积代入相应的标准曲线中来计算得出待测茶样中目标物的含量。