[发明专利]一种炒青绿茶中吡嗪类化合物的检测方法

说明书

本发明公开了一种炒青绿茶中吡嗪类化合物的检测方法，包括如下步骤：(1)配置10个不同系列浓度的吡嗪混合标准工作液，加入到空白基质样品中，红外辅助顶空固相微萃取技术进行萃取，GC‑QqQ‑MS/MS多反应监测(MRM)模式进行分析检测，然后绘制色谱峰面积与对应吡嗪类化合物浓度的标准工作曲线；(2)与步骤(1)相同的条件下提取炒青绿茶中的吡嗪类化合物并进行分析，标准加入法进行定量。本发明将红外辅助顶空固相微萃取技术与气相色谱‑三重四极杆串联质谱技术相结合，样品前处理简单，选择性好，灵敏度高，解决了炒青绿茶中吡嗪类化合物水平低，以及炒青绿茶中复杂基质对目标物分析干扰严重的影响，可以实现炒青绿茶中吡嗪类化合物快速、准确地测定。

技术领域

本发明属于化学分析领域，涉及了一种炒青绿茶中吡嗪类化合物的检测方法。

背景技术

炒青绿茶是我国绿茶的主要品类，以其香气高鲜、滋味浓醇的优异品质备受消费者的青睐，诸多名优绿茶，如西湖龙井、信阳毛尖和碧螺春等均属于炒青绿茶。目前，绿茶香气成分的研究中，已分离鉴定包括醇、醛、酮、酯、酸、氮氧杂环类化合物等在内200余种香气组分，其中吡嗪类化合物，香气特征突出，香味阈值低，对炒青绿茶特征品质的形成具有重要贡献。

Kumazawa等(Journal of Agricultural and Food Chemistry,2002,50(20),5660-5663)测定了炒青类绿茶香气组分的香气稀释因子(FD)，其中2-乙酰基-1-吡咯啉、2-乙基-3,5-二甲基吡嗪、四甲基吡嗪、2-乙酰基-2-噻唑啉、2,3-二乙基-5-甲基吡嗪有着非常高的FD值，这些吡嗪类、吡咯类物质是炒青绿茶的关键香气组分。Mizukami等(Journalof Agricultural and Food Chemistry,2006,54(19),7370-7377)研究炒青绿茶干燥过程中Maillard反应中间产物丙烯酰胺的浓度变化与香气品质的关系，通过AEDA分析，2-乙基-3,6-二甲基吡嗪和2-乙基-3,5-二甲基吡嗪被鉴定为关键的香气组分。Baba等(Journal ofAgricultural and Food Chemistry,2014,62(33),8308-8313)研究了龙井、毛峰、碧螺春三种主要的绿茶品种，通过AEDA分析，4-羟基-2,5-二甲基-3(2H)-呋喃酮、3-羟基-4,5-二甲基-2(5H)-呋喃酮、香豆素、香草醛、香叶醇、(E)-异月桂醇和2-甲氧基苯酚7种化合物在三个品种均显示很高的FD值，是绿茶的关键香气成分；2-异丙基-3-甲基吡嗪、2-乙烯基-3,5-二甲基吡嗪、顺式-4,5-环氧-(E)-2-癸烯醛、4-乙基愈创木酚、(E)-异丁烯醇和3-苯基丙酸酸这6种化合物为绿茶中首次报道的比较重要香气成分。

目前国内外有关吡嗪类物质的提取方法主要有溶剂提取、液-液萃取(LLE)、固相萃取等,这些方法通常需要较长的处理时间、操作繁琐、劳动强度大，且消耗大量的有机溶剂，已不能满足现代食品分析的要求。目前，简便、快速、高效、绿色环保是当前样品前处理方法的发展方向和要求。在吡嗪类物质的检测分析中，最早使用的是气相色谱火焰离子检测器(FID)，对于含量低的物质灵敏度不够。尽管气相色谱能有效的对不同的成分进行分离，但是对于一些特殊的组分很难进行可靠的检测，因此需要联合质谱检测器。王莉等(食品与生物技术学报,2014,(08),891-895)采用气相色谱质谱联用仪对白酒中吡嗪类物质进行定性分析，该方法引入除去大部分酯类和醇类的提取步骤，有效提高了吡嗪类物质的检出，但是该方法仅局限于定性分析，同时该方法前处理步骤非常复杂，需要较长时间，因为前处理步骤太多也会导致目标物在前处理过程中的损失。