[发明专利]一种UPCC法测定维生素D2注射液中维生素D2含量的方法

权利要求书

1.一种UPCC法测定维生素D2注射液中维生素D2含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤(1)，分别将维生素D2和维生素D3对照品用正己烷溶解，并分别配制成浓度为0.25mg/ml和0.25mg/ml的溶液，作为维生素D2和维生素D3对照品标准储备溶液待用；

步骤(2)，将维生素D2注射液用正己烷溶解，配制成浓度为25μg/ml的溶液，过滤，制成供试品溶液待用；

步骤(3)，分别取步骤(1)配制的维生素D2、维生素D3对照品标准储备溶液，加正己烷稀释制成维生素D2和维生素D3浓度均为25μg/ml的混合对照品标准溶液，作为系统适用性试验溶液；使用超高效合相色谱仪分析，并得到维生素D2与维生素D3的分离度；

步骤(4)，取步骤(1)配制的维生素D2对照品标准储备溶液，配制梯度浓度的标准溶液；使用超高效合相色谱仪分析，并根据得到的色谱绘制维生素D2的标准曲线；

步骤(5)，在步骤(4)的相同液相色谱条件下检测步骤(2)制得的供试品溶液，再利用步骤(4)得到的维生素D2的标准曲线来计算维生素D2的含量；

其中在上述步骤(3)(4)(5)的色谱中，流动相为超临界CO2，改性剂为四氢呋喃；超临界CO2与四氢呋喃的体积比为95:5；色谱柱以亚乙基桥杂化颗粒为填充剂；流速为0.3～1.5ml/min，柱温为不大于50℃，进样量为5μl，背压为2700psi；检测波长为254nm。

2.根据权利要求1所述的UPCC法测定维生素D2注射液中维生素D2含量的方法，其特征在于，步骤(3)系统适用性试验溶液得到的色谱图中，维生素D2与维生素D3的分离度大于1.5。

3.根据权利要求1所述的UPCC法测定维生素D2注射液中维生素D2含量的方法，其特征在于，所述流速为1.0ml/min。

4.根据权利要求1所述的UPCC法测定维生素D2注射液中维生素D2含量的方法，其特征在于，所述柱温为45℃。

5.根据权利要求1所述的UPCC法测定维生素D2注射液中维生素D2含量的方法，其特征在于，重复步骤(5)一次以上，取平均值进行计算维生素D2注射液中维生素D2的含量。