[发明专利]一种用于检测丙二酰辅酶A的分子探针有效
| 申请号： | 201810641532.1 | 申请日： | 2018-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN108752484B | 公开（公告）日： | 2021-06-15 |
| 发明（设计）人： | 卫涛涛;杜贻鹏 | 申请（专利权）人： | 中国科学院生物物理研究所 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/65;C12N15/62;C12Q1/66 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;张立娜 |
| 地址： | 100101*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 丙二酰 辅酶 分子 探针 | ||
1.融合蛋白，其特征在于：所述融合蛋白自N端到C端依次由NanoLuc荧光素酶大亚基、连接肽I、FapR△43蛋白、连接肽II和NanoLuc荧光素酶小亚基融合而成；
所述FapR△43蛋白为氨基酸序列为SEQ ID No.1的第175-318位所示的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述NanoLuc荧光素酶大亚基为氨基酸序列为SEQ ID No.1的第1-159位所示的蛋白质。
3.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述NanoLuc荧光素酶小亚基为氨基酸序列为SEQ ID No.1的第332-342位所示的蛋白质。
4.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述连接肽I为氨基酸序列为SEQ IDNo.1的第160-174位所示的多肽。
5.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述连接肽II为氨基酸序列为SEQ IDNo.1的第319-331位所示的多肽。
6.根据权利要求1-5中任一所述的融合蛋白，其特征在于：所述融合蛋白为如下任一所示蛋白质：
（F1）氨基酸序列为SEQ ID No.1所示的蛋白质；
（F2）在（F1）所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白。
7.编码权利要求1-6中任一所述融合蛋白的核酸分子。
8.根据权利要求7所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子为编码权利要求1-6中任一所述融合蛋白的融合基因；
所述融合基因中编码所述NanoLuc荧光素酶大亚基的基因为SEQ ID No.2的第1-477位所示的DNA分子。
9.根据权利要求8所述的核酸分子，其特征在于：所述融合基因中编码所述FapR△43蛋白的基因为SEQ ID No.2的第523-954位所示的DNA分子。
10.根据权利要求8所述的核酸分子，其特征在于：所述融合基因中编码所述NanoLuc荧光素酶小亚基的基因为SEQ ID No.2的第994-1026位所示的DNA分子。
11.根据权利要求8所述的核酸分子，其特征在于：所述融合基因中编码所述连接肽I的基因为SEQ ID No.2的第478-522位所示的DNA分子。
12.根据权利要求8所述的核酸分子，其特征在于：所述融合基因中编码所述连接肽II的基因为SEQ ID No.2的第955-993位所示的DNA分子。
13.根据权利要求8-12中任一所述的核酸分子，其特征在于：所述融合基因为SEQ IDNo.2所示的DNA分子。
14.含有权利要求7-13中任一所述核酸分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
15.一种用于检测丙二酰辅酶A的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有权利要求1-6中任一所述的融合蛋白和NanoLuc荧光素酶的底物。
16.如下任一应用：
（A）权利要求7-13中任一所述的核酸分子或权利要求14所述的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在制备权利要求1-6中任一所述的融合蛋白或权利要求15所述试剂盒中的应用；
（B）权利要求1-6中任一所述的融合蛋白或权利要求7-13中任一所述的核酸分子或权利要求14所述的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌或权利要求15所述试剂盒在检测丙二酰辅酶A中的应用；所述应用为非疾病诊断治疗性应用。
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