[发明专利]快速检测转基因产品的试纸条

权利要求书

1.一种快速检测转基因产品的试纸条，其顺次包括：样品垫、金标结合垫、硝酸纤维素膜检测区和吸水垫；

金标结合垫上涂有胶体金标记的地高辛抗体；

硝酸纤维素膜检测区设置有检测线和质控线；所述检测线通过在硝酸纤维素膜检测区上包被链亲和素形成；所述质控线通过在硝酸纤维素膜检测区上包被羊抗鼠IgG形成；

待检测产品的反应产物被滴到样品垫上后通过毛细管作用，向着吸水垫的方向层析。

2.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于：

所述试纸条设置有外壳，所述外壳在对应于样品垫的位置形成有凹孔；所述外壳在对应于检测线和质控线的位置形成有观察窗。

3.如权利要求2所述的试纸条，其特征在于：

所述凹孔形成为喇叭口状。

4.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于：

所述待检测的样本经过如下步骤后形成反应产物：

步骤1)样本处理：取30mg待测粉状物样本，加500μl ddH2O，使用移液枪多次吹吸混匀，静置5min得到待测样本备用；

步骤2)DNA一管法提取步骤：取5μl核酸释放剂，加入PCR反应管中；取所述待测样本5μl加入对应的PCR反应管中，并用移液器在管底吹打混匀10次；每个PCR反应管中加30μl无菌石蜡油；将PCR反应管放置在PCR仪中进行裂解，得到裂解样品；

步骤3)试样PCR反应：在PCR反应管中依次加入反应试剂、混匀，加入到所述裂解样品中；将PCR反应管放到离心机上，500g-1000g离心10s，然后取出PCR反应管，放入PCR仪中进行扩增得到反应产物。

5.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于：

所述步骤2)中的裂解程序为将样品置于95℃反应10min后，再置于4℃冷却5min。

6.如权利要求4所述的试纸条，其特征在于：

所述步骤3)中的PCR反应体系总体积为35μl，其中：ddH2O为27.4μl，10×PCR Buffer为5μl，du dNTP混合液为1μl；10μmol/L上游引物为0.3μl，10μmol/L下游引物为0.3μl，TaqDNA聚合酶为1μl；

其中10×PCR Buffer含有0.1％体积的DMSO、3～5％体积的BSA、1％～2％体积的PEG-6000、100mmol/L KCl、1mmol/L MgCl₂、50mmol/L pH＝8.0Tris-HCl。

7.如权利要求4所述的试纸条，其特征在于：所述上游引物序列为地高辛标记；所述下游引物序列为生物素标记。

8.如权利要求4所述的试纸条，其特征在于：

所述步骤3)中的PCR扩增程序如下：50℃反应2分钟后升温到95℃反应5分钟，然后进入32次循环，每次循环中在95℃反应15sec，然后在60℃反应45sec。

9.如权利要求4所述的试纸条，其特征在于：

所述核酸释放剂含有120～200mM/L的KCl、1％～5％体积的Triton X-100、5～10mg/ml的蛋白酶K、5-10μM/ml甘氨酸、10mM/ml的NaOH。

10.如权利要求2所述的试纸条，其特征在于：

在所述外壳上对应于所述凹孔形成有装有超纯水的水囊，水囊破后，超纯水滴入样品垫，以加快层析。