[发明专利]快速检测转基因产品的试纸条

说明书

本发明公开了一种快速检测转基因产品的试纸条，其顺次包括：样品垫、金标结合垫、硝酸纤维素膜检测区和吸水垫；金标结合垫上涂有胶体金标记的地高辛抗体；硝酸纤维素膜检测区设置有检测线和质控线；所述检测线通过在硝酸纤维素膜检测区上包被链亲和素形成；所述质控线通过在硝酸纤维素膜检测区上包被羊抗鼠IgG形成；待检测产品的反应产物被滴到样品垫上后通过毛细管作用，向着吸水垫的方向层析。

技术领域

本发明属于核酸检测技术领域，具体地涉及一种快速检测转基因产品的试纸条。

背景技术

一般转基因检测分为核酸水平检测和蛋白水平检测。

蛋白水平检测(现有胶体金蛋白试纸技术)检测便捷，但是由于有些转基因样品蛋白未能表达，且蛋白容易降解，因此有可能待测样品内蛋白表未达或者待测样品储存条件造成降解，所以造成假阴性结果(阳性未检出)。蛋白试纸条方法具有快速、简便、经济的优点，无需任何特殊仪器设备，但由于其检测灵敏度较低、适用范围窄，主要适用于转基因植物的大田和原材料的快速初筛。

PCR方法是基于基因水平的检测，可检出存在于样品基因组内的待测基因而不受基因表达情况的影响。但是PCR方法对实验设施和条件要求较高，且比较费时。目前普通PCR检测方法是我国转基因植物检测的核心技术，但该方法对实验条件要求较高，对实验区要求具有前PCR区、样品制备区、核酸提取纯化区、PCR体系配置区、PCR反应区、电泳分析区等功能区，需要生物安全柜、高压灭菌锅、组织粉碎机、恒温水浴锅、高速冷冻离心机、核酸定量检测仪器、生物安全柜、PCR扩增仪、涡旋混合仪、电泳系统、凝胶成像系统等。

发明内容

鉴于上述问题，本发明旨在提出一种析快速检测转基因产品的试纸条，其仅需使用较少设备就能快速地以PCR方法进行转基因产品检测。

本发明的快速检测转基因产品的试纸条，其顺次包括：样品垫、金标结合垫、硝酸纤维素膜检测区和吸水垫；

金标结合垫上涂有胶体金标记的地高辛抗体；

硝酸纤维素膜检测区设置有检测线和质控线；所述检测线通过在硝酸纤维素膜检测区上包被链亲和素形成；所述质控线通过在硝酸纤维素膜检测区上包被羊抗鼠IgG形成；

待检测产品的反应产物被滴到样品垫上后通过毛细管作用，向着吸水垫的方向层析。

优选地，所述试纸条设置有外壳，所述外壳在对应于样品垫的位置形成有凹孔；所述外壳在对应于检测线和质控线的位置形成有观察窗。

优选地，所述凹孔形成为喇叭口状。

优选地，所述待检测的样本经过如下步骤后形成反应产物：

步骤1)样本处理：取30mg待测粉状物样本，加500μl ddH2O，使用移液枪多次吹吸混匀，静置5min得到待测样本备用；

步骤2)DNA一管法提取步骤：取5μl核酸释放剂，加入PCR反应管中；取所述待测样本5μl加入对应的PCR反应管中，并用移液器在管底吹打混匀10次；每个PCR反应管中加30μl无菌石蜡油；将PCR反应管放置在PCR仪中进行裂解，得到裂解样品；

步骤3)试样PCR反应：在PCR反应管中依次加入反应试剂、混匀，加入到所述裂解样品中；将PCR反应管放到离心机上，500g-1000g离心10s，然后取出PCR反应管，放入PCR仪中进行扩增得到反应产物。

优选地，所述步骤2)中的裂解程序为将样品置于95℃反应10min后，再置于4℃冷却5min。

优选地，所述步骤3)中的PCR反应体系总体积为35μl，其中：ddH2O为27.4μl，10×PCR Buffer为5μl，du dNTP混合液为1μl；10μmol/L上游引物为0.3μl，10μmol/L下游引物为0.3μl，Taq DNA聚合酶为1μl；