[发明专利]一种用于检测沙门氏菌活性的荧光RAA引物、探针及检测方法在审
申请号: | 201810645361.X | 申请日: | 2018-06-21 |
公开(公告)号: | CN108707682A | 公开(公告)日: | 2018-10-26 |
发明(设计)人: | 周冬根;罗洁;应清界;俞雪钧 | 申请(专利权)人: | 宁波国际旅行卫生保健中心 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/10;C12N15/11 |
代理公司: | 厦门福贝知识产权代理事务所(普通合伙) 35235 | 代理人: | 郝学江 |
地址: | 315012 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 沙门氏菌 荧光 引物 检测 荧光探针 探针 定性检测 粪便样本 粪便样品 快速诊断 全程监控 诊断结果 常温下 灵敏度 病死 诊断 治疗 | ||
1.一种用于检测沙门氏菌的引物对,其特征在于,所述引物对包括下述1)-3)中的至少一种:
1)序列表中SEQ ID№:1所示核苷酸序列和序列表中SEQ ID№:2所示核苷酸序列;
2)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID№:1限定的核苷酸序列杂交的核苷酸序列;和在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID№:2限定的核苷酸序列杂交的核苷酸序列;
3)与1)、或2)限定的核苷酸序列具有90%以上同源性,且具有相同功能的核苷酸序列。
2.一种用于检测沙门氏菌的探针,其特征在于,所述探针包括下述1)-3)中的至少一种:
1)所述探针的核苷酸序列为:
5'-CTCKATTGTCACKGTGGTYCAGTTTATCGNTMTNACCAAAGGTTCA-3',
其中,所述N代表任意核苷酸或任意修饰后的核苷酸,所述M代表具环状结构的化合物;
2)在高严谨条件下可与1)所述的探针的核苷酸序列杂交的核苷酸序列;
3)与1)、或2)所述的探针的核苷酸序列具有90%以上同源性,且具有相同功能的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的探针,其特征在于,所述探针的核苷酸序列为序列表中SEQ ID№:3所示核苷酸序列。
4.一种用于检测沙门氏菌的组合物,其特征在于,所述组合物包括下述1)和2):
1)权利要求1所述的引物对;
2)权利要求2或3任一所述的探针。
5.一种用于检测沙门氏菌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括下述1)-3)所述中的至少一种:
1)权利要求1所述的引物对;
2)权利要求2或3任一所述的探针;
3)权利要求4所述组合物。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,当所述试剂盒同时包括所述的引物对和所述的探针时,所述的引物对与所述的探针的摩尔比为21:21:6。
7.一种沙门氏菌的检测方法,其特征在于:所述检测方法不包括疾病的诊断或治疗的方法;所述检测方法包括使用下述1)-3)中的至少一种进行检测:
1)权利要求1所述的引物对;
2)权利要求2或3任一所述的探针;
3)权利要求4所述组合物。
8.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于:所述检测方法还包括下述1)-2)中的至少一种:
1)当所述检测方法同时使用了所述的引物对和所述的探针时,所述的引物对与所述的探针的摩尔比为21:21:6;
2)提取待检测样品的DNA作为模板,进行RAA反应,所述RAA反应的反应温度包括37-39℃;反应时间包括20分钟以上。
9.权利要求1所述引物对、权利要求2或3任一所述探针、权利要求4所述组合物、权利要求5-6任一所述试剂盒、权利要求7-8任一所述检测方法在检测沙门氏菌中的应用,所述应用不包括涉及疾病的诊断或治疗方法的应用。
10.权利要求1所述引物对、权利要求2或3任一所述探针、权利要求4所述组合物、权利要求5-6任一所述试剂盒、权利要求7-8任一所述检测方法在制备检测沙门氏菌相关产品中的应用。
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