[发明专利]山茱萸提取莫诺苷、马钱苷和熊果酸的方法

权利要求书

1.一种从山茱萸中提取莫诺苷、马钱苷和熊果酸的方法，包括如下步骤：

(1)将山茱萸果实进行干燥并粉碎，加入60～85％乙醇水溶液进行室温提取1～3h，过滤得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ，其中加入60～85％乙醇水溶液体积L与山茱萸干重比为2～5：1；

(2)滤液Ⅰ在40℃～55℃下进行真空或减压浓缩至原有体积的1/10～1/25，过滤一次得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ；

(3)向滤渣Ⅰ中加入少量的水，再接种10～15％的枯草芽孢杆菌，进行30℃～35℃发酵24～36h，得发酵物，其中加入水体积L与山茱萸干重比为3～10：50；

(4)将发酵物加入乙醇进行室温提取1～3h，过滤得滤液Ⅲ和滤渣Ⅲ，其中加入乙醇体积L与酶解液体积L比为3～6：1，其中乙醇为95％以上的乙醇或无水乙醇；

(5)滤液Ⅲ在40℃～55℃下进行真空或减压浓缩至原有体积的1/15～1/30，陶瓷膜过滤一次得滤液Ⅳ和滤渣Ⅳ；

(6)将滤液Ⅱ和滤液Ⅳ合并后上AB‐8大孔树脂柱进行吸附，用四倍至六倍柱体积的20～40％乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液Ⅰ；

(7)将洗脱液Ⅰ进行40℃～55℃下进行真空或减压浓缩至干燥物A，得莫诺苷纯品；

(8)将滤渣Ⅱ和滤渣Ⅳ加入无水甲醇溶解，上硅胶柱进行吸附，用三倍至五倍柱体积的甲醇水溶液进行柱洗脱，得到洗脱液Ⅱ，最后三倍至五倍柱体积氯仿‐甲醇溶液进行柱洗脱，得到洗脱液Ⅲ，洗脱液Ⅱ和洗脱液Ⅲ在50℃～65℃下进行真空或减压浓缩至干，分别获得干燥物B、干燥物C；

(9)干燥物B加入乙醇溶液在40～45℃下保温15～30min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶重结晶一次得熊果酸纯品；

(10)干燥物C加入丙酮在35～40℃下保温15～30min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶重结晶一次，得马钱苷纯品。

2.权利要求1方法，其中所述过滤过程是纱布过滤、陶瓷膜过滤，其中，优选是三层纱布过滤2次、陶瓷膜过滤1次。

3.权利要求1方法，其中步骤(8)中所述无水甲醇的使用量，按体积/滤渣Ⅰ重量比为2～4L:1kg。

4.权利要求1方法，其中步骤(8)所述甲醇水溶液是指含有70～90％甲醇的pH5.5～6.5的盐酸水溶液。

5.权利要求1方法，其中步骤(8)中所述氯仿‐甲醇溶液是指氯仿与甲醇的体积比为2:1～2。

6.权利要求1方法，其中步骤(9)中所述乙醇溶液是指80～85％乙醇水溶液，所用体积与所得干燥物B的重量比为1L～3L：1kg。

7.权利要求1方法，其中步骤(10)中所述丙酮的体积与干燥物C重量比为2～5L:1kg。