[发明专利]一种唾液酸电化学试纸及其制备与检测方法

权利要求书

1.一种唾液酸电化学试纸的制备方法，其特征在于，所述唾液酸电化学试纸包括

绝缘基片；

导电电极，所述导电电极包括设置在绝缘基片上的三条条状导电电极，分别为工作电极、参比电极和短路电极，其中设置在导电电极传导区一端的短路电极与工作电极或参比电极相接；

绝缘隔离层，所述绝缘隔离层局部覆盖于导电电极上，绝缘隔离层的一端露出导电电极的反应区，另一端露出导电电极的传导区；

反应层，所述反应层为酶反应膜，所述酶反应膜覆盖于反应区的参比电极及工作电极表面，位于绝缘隔离层的反应区端；

前处理层，所述前处理层设置在反应层的前端，覆盖于反应区的参比电极及工作电极表面；

虹吸导样槽，所述反应层和前处理层设置在虹吸导样槽内；虹吸导样槽的前端为采样口；

粘合隔片，所述粘合隔片与绝缘隔离层、前处理层、反应层和虹吸导样槽的上端面叠接；

所述酶反应膜包括与唾液酸反应的酶和一种电子传递介体，所述酶为神经氨酸苷酶、神经氨酸醛缩酶、酮胺氧化酶或过氧化物酶中的一种或组合，其中，神经氨酸苷酶含量为1％-3％、神经氨酸醛缩酶含量为0.1％-1％、酮胺氧化酶含量为0.5％-2％，过氧化物酶0.5％-2％；所述电子传递介体为亚铁氰化钾，质量分数含量为3％-10％；

所述前处理层的浆液中含有唾液酸水解剂，所述唾液酸水解剂含量为2.0％-8.5％；

所述制备方法包括如下步骤：

1）采用丝网印刷技术在0.25mm厚PET塑料基片上制作工作电极、参比电极和短路电极，通过丝网印刷将导电油墨在PET塑料基片上铺上分散均匀的油墨薄层后，放到80℃烘箱中烘干60min；

2）采用丝网印刷技术在印好电极系统的基片上印刷绝缘漆作为电绝缘隔离层，通过丝网印刷将绝缘漆在PET塑料基片上铺上分散均匀的油墨薄层后，放到紫外烘干机烘干1分钟；

3）用点酶机在电极表面固定酶反应膜用于血液唾液酸的检测，所取酶反应液的各组分及其重量百分比见表1：

表1

取4μL酶反应液滴加到电极表面，50℃烘干20min，备用；

4）用点酶机在前处理区表面固定前处理层用于对样品中的结合唾液酸进行水解，所取前处理层浆液的各组分及其重量百分比见表2：

表2

取4μL前处理层浆液滴加到前处理区绝缘基片表面，50℃烘干20min，备用；

5）前处理层浆液固定后，用粘合隔片将表面封装片、PET基片粘合，粘合隔片上设有开槽，对应于电极反应区域，及暴露电极上有酶反应试剂的一端，以及参比电极和短路电极，PET基片、粘合隔片和表面封装片组成虹吸导样槽及采样口。