[发明专利]一种元麦提取物的制备方法及其在细胞抗氧化方面的用途

说明书

本发明提供了一种元麦提取物的制备方法及其在抗氧化方面的用途，属于食品功能开发领域。以新鲜元麦为原料，用乙醇提取其中的活性物质，并通过有机试剂萃取、浓缩、真空冷冻干燥，制备元麦提取物；建立H₂O₂诱导细胞损伤模型，采用MTT法、试剂盒检测法发现，元麦提取物对氧化应激下的细胞存活率有显著提高，能够明显降低细胞中ROS水平，提高超氧化物歧化酶酶活、还原型谷胱甘肽含量，降低细胞外乳酸脱氢酶的释放量，在抗氧化方面的用途十分显著。本发明处理方式简单，深度利用元麦资源，以接近于体内生理状况的方式发明了元麦提取物在细胞抗氧化方面的作用；提取物为固体粉末，不仅易于运输，而且可作为辅料添加在食品中，应用范围十分广泛。

一、技术领域

本发明提供了一种元麦提取物的制备方法及其在抗氧化方面的用途，属于食品功能开发领域。

二、背景技术

二十一世纪以来，全谷物食品的健康益处颇受关注，其推荐摄入标准连年提高。全谷物食品含有多种营养素，包括蛋白、氨基酸、多糖、淀粉、膳食纤维、维生素以及酚类物质，其中所含有的酚类物质以其显著的抗氧化作用受到越来越多的关注。

元麦即裸大麦，又名青稞，是一种禾本科(Gramineae)大麦属(Hordeum)的谷物作物，可分为白元麦、黑元麦、墨绿元麦等，在我国具有悠久的栽培历史。当前，在所有人工种植粮食作物中，元麦的营养和使用价值较高，具备“高蛋白质、高纤维含量、低脂肪、低糖”的显著特点，营养成分高于水稻、小麦、玉米等其他经济作物。随着研究的深入，元麦作为一种药食同源植物，除了在传统食品加工中被广泛使用(元麦酒、元麦糌粑等的主要原料)，还有望在医疗、保健领域得到关注，发挥更大的经济价值和社会效益。

医学研究表明，人体衰老与自由基有很大关系。通常，人体的生理活动和药物摄入、辐射、烟草等均可以产生自由基，当自由基在体内超出一定量的时候，会引起正常细胞的死亡和组织损坏，引发疾病和衰老。如超氧阴离子自由基、羟自由基产生的氧化胁迫等会对生物分子造成损伤，破坏细胞的新陈代谢。H₂O₂是机体氧化还原反应过程中的阶段产物，可以诱导细胞内活性氧自由基(Reactive oxygen species，ROS)大量生成，从而导致氧化损伤，由于其易于获得，性质相对稳定，已成为研究细胞氧化损伤的重要工具。

本专利以元麦为原料，用优化后的提取工艺提取元麦活性物质，并通过有机试剂萃取、大孔树脂层析法对提取物进行纯化，制备元麦高活性提取物；此外，以H₂O₂作为损伤剂，对元麦提取物的细胞氧化损伤保护进行研究，采用MTT法、试剂盒检测法测定了细胞存活率、抗氧化酶活力、细胞膜完整性、细胞凋亡等情况。该发明方法有效制备了元麦提取物，评价了该提取物在细胞抗氧化方面的能力，对元麦的功能性食品开发和功能性评价具有十分重要的现实意义。

三、发明内容

本发明主要开发一种元麦提取物的制备方法及其在抗氧化方面的用途，首先从新鲜元麦中提取、分离、纯化得到高活性元麦提取物，再通过H₂O₂诱导，建立细胞氧化损伤模型；采用MTT的方法测定元麦提取物对细胞活力的保护作用；采用试剂盒检测的方法研究细胞ROS水平、细胞抗氧化酶酶活(如超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)、细胞中关键抗氧化剂含量(如还原型谷胱甘肽(GSH))、以及表征细胞膜完整性重要酶酶活(如乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase，LDH))的变化情况，综合评价元麦提取物在细胞抗氧化方面的用途。

技术方案：以白色、黑色、墨绿色等不同颜色的元麦为原料，用乙醇提取其中的活性物质，并通过有机试剂萃取、浓缩、真空冷冻干燥，制备元麦提取物，测定其在H₂O₂诱导细胞损伤模型中的作用，以上方法为：

(1)元麦的预处理：称取颗粒饱满、洗净晾干的元麦仁，粉碎后过40-80目筛，得到元麦粉末；