[发明专利]一种快速扩增核酸的方法

权利要求书

1.一种快速扩增核酸的方法，其特征在于，所述方法是通过将聚合酶链式反应(PCR)的反应液在两个温度点之间进行反复升温和降温，在变温的过程中实现对目标序列的快速扩增。

2.根据权利要求1所述的两个温度点，分别为高温点和低温点，扩增过程中，高温点和低温点的温度无需精确控制，高温点的温度可以在目标扩增序列的退火温度(Tm)到98℃之间取任意值，低温点的温度可以在引物的退火温度附近取任意值，一般为Tm±5℃。

3.根据权利要求1所述的快速核酸检测方法，其特征在于，该方法在实现快速扩增的过程中，在高温点和低温点不做时间停留，或者停留时间极短(0-2秒)。

4.根据权利要求1所述的快速扩增核酸的方法，其特征在于，所涉及的两个温度点，在同一个反应的不同循环中，可以是不同的值，只需保证在高温点和低温点的可取范围内即可。

5.根据权利要求1所述的快速扩增核酸的方法，其特征在于，所涉及引物的退火温度可在40-80℃之间变化，最优温度在70℃附近。

6.根据权利要求1所述的快速扩增核酸的方法，其特征在于，该方法可应用于核酸的定性和定量分析。

7.根据权利要求1所述的快速扩增核酸的方法，其特征在于，该方法适用于基于DNA非特异性结合染料的定量分析方法和基于荧光染料标记的序列特异性寡核苷酸引物或探针的定量分析方法。

8.根据权利要求1所述的快速扩增核酸的方法，其特征在于，该方法适用于以PCR为基础的核酸扩增和分析方法，包括real-time Quantitative PCR、RT-PCR、touch-down PCR、nest PCR、asymmetric PCR、allel-specific PCR、mulitiplex PCR、digital PCR、测序等。