[发明专利]一种添加渗透保护剂提高微藻保存成活率的方法在审
申请号: | 201810655546.9 | 申请日: | 2018-06-23 |
公开(公告)号: | CN110628691A | 公开(公告)日: | 2019-12-31 |
发明(设计)人: | 邓敏丽 | 申请(专利权)人: | 邓敏丽 |
主分类号: | C12N1/38 | 分类号: | C12N1/38;C12N1/12;C12R1/89 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 225000 江苏省扬州市江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 藻种 保种 渗透保护剂 干管 微藻 培养皿 低温浴槽 定时取样 实验材料 无菌操作 存活率 目测 称取 放入 后镜 邻域 收藻 液氮 移入 预冻 成活率 备用 存活 复活 保存 平衡 试验 污染 | ||
1.一种添加渗透保护剂提高微藻保存成活率的方法,其特征在于,制备方法包括以下步骤:
(A1)藻种培养:藻种和实验材料在无菌操作下培养数天,离心收藻,4oC冰箱备用;
(A2)加入渗透保护剂:称取适量渗透保护剂,加入藻种中,混合均匀,移入冻干管中,平衡一定时间;
(A3)梯度降温保种:将上述冻干管放入KF-4型低温浴槽中,以一定降温速率降至从0oC降温到-30oC~-40oC,预冻一段时间,然后又投入液氮(-196℃ )中,保种;
(A4)检测:定时取样进行复活试验,室温下培养10天,先目测,后镜检,以判断是否存活。
2.根据权利要求1所述的一种添加渗透保护剂提高微藻保存成活率的方法,其特征在于步骤(A2)中,渗透保护剂包括蔗糖、聚乙二醇或二甲基亚砜的一种。
3.根据权利要求1所述的一种添加渗透保护剂提高微藻保存成活率的方法,其特征在于步骤(A2)中,降温速率为0.5~1oC/min。
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