[发明专利]一种用于检测人药物基因多态性的多重PCR检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于检测人药物基因多态性的多重PCR检测试剂盒，包括根据VKORC1、UGT1A1、HLA‑A、HLA‑B、TPMT、NAT1、NAT2、G6PD、F5、F2、IFNL3、APOE、COMT、CYP1A2、CYP2B6、CYP2C19、CYP2C9、CYP2D6、CYP3A5、MTFHR、SLCO1B1、DPYD基因的多态性位点设计的在同一反应体系中反应的六十六PCR扩增引物对及在同一反应体系中反应的六十六单碱基延伸引物。本发明的多重PCR检测试剂盒能快速、特异、高效地检测22基因的上述85个SNP位点的多态性，从而能对心脑血管疾病标准方案疗效进行预测，便于临床医生有针对性地制定治疗方案，对不同型别的患者采取区别对待及治疗，从而提高整个心脑血管疾病的诊疗水平。

技术领域

本发明属于生物医学分子检测技术领域，具体涉及一种用于检测人药物基因多态性的多重PCR检测试剂盒。

背景技术

药物体内代谢、转运及药物作用靶点基因的遗传变异及其表达水平的变化可通过影响药物的体内浓度和敏感性，导致药物反应性个体差异。近年来随着人类基因组学的发展，药物基因组学领域得到了迅猛发展，越来越多的药物基因组生物标记物及其检测方法相继涌现。药物基因组学已成为指导临床个体化用药、评估严重药物不良反应发生风险、指导新药研发和评价新药的重要工具，部分上市的新药仅限于特定基因型的适应症患者。美国FDa已批准在140余种药物的药品标签中增加药物基因组信息，涉及的药物基因组生物标记物42个。此外，部分行业指南也将部分非FDa批准的生物标记物及其特性(如MgMt基因甲基化)的检测列入疾病的治疗指南。药物反应相关基因及其表达产物的分子检测是实施个体化药物治疗的前提。

药理学与遗传学结合的关键环节包括药物代谢动力学(pharmacokinetics，PK)和药物效应动力学(pharmacodynamics，PD)两方面。药物代谢动力学主要是定量研究药物在生物体内吸收、分布、代谢和排泄规律，侧重于阐明药物的体内过程；药物效应动力学主要研究药物对机体的作用、作用规律及作用机制，其内容包括药物与作用靶位之间相互作用所引起的生化、生理学和形态学变化，侧重于解释药物如何与作用靶点发生作用。对药物代谢酶和药物靶点基因进行检测可指导临床针对特定的患者选择合适的药物和给药剂量，实现个体化用药，从而提高药物治疗的有效性和安全性，防止严重药物不良反应的发生。

根据药物基因组生物标志物检测指导个体化用药主要包括两种类型：一是根据个体的遗传信息调整用药剂量，以增加药物疗效，减少药物不良反应的发生；二是根据个体的遗传信息确定用药的种类，避免应用针对特定基因型个体无效或可能产生严重药物不良反应的药物。药物剂量的调整往往需根据随机对照临床研究的结果；对目前缺乏随机对照临床研究的遗传变异，可依据基因型对药物药代动力学曲线下面积影响的大小估算用药剂量；当一个药物的反应性受多个基因或基因与环境因素间相互作用影响时，可根据国内国际大规模临床试验推导出的、纳入了个体基因型及其他因素的用药剂量计算公式确定用药剂量。常见药物代谢酶和药物作用靶点基因遗传变异检测结果对临床用药的指导建议。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于检测人药物基因多态性的多重PCR检测试剂盒。

本发明的检测原理如下：

本发明的多重PCR检测试剂盒分别设计合成针对66种位点的PCR扩增特异性引物对和单碱基延伸引物，然后进行PCR扩增、SAP反应和iPLEX单碱基延伸反应。样本单碱基延伸产物经过树脂脱盐，然后通过MaLDI-tOF(基质辅助激光解吸电离-飞行时间)质谱仪分析，检测不同延伸产物间的分子量差异，确定这85个SNP位点处的碱基类型，从而将进行基因分型，可直接判断基因型，从而根据不同基因分型的病人采用不同的治疗方式。

本发明的技术方案如下：