[发明专利]多倍体罗汉果植株的培育方法在审
| 申请号： | 201810660394.1 | 申请日： | 2018-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN109042315A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 谢雨欣 | 申请（专利权）人： | 浦江县美泽生物科技有限公司 |
| 主分类号： | A01H1/08 | 分类号： | A01H1/08;A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京国翰知识产权代理事务所(普通合伙) 11696 | 代理人： | 吕彩霞 |
| 地址： | 322200 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多倍体 罗汉果 植株 甘露醇 液体培养基 转接 雌株 丛芽 茎段 幼芽 接种 培育 染色体倍性 生根培养基 无菌试管苗 诱导培养基 纯化培养 扩大培养 扩繁培养 生根培养 遗传性状 诱导培养 培养基 速率和 诱导率 放入 茎尖 腋芽 诱导 | ||
1.多倍体罗汉果植株的培育方法，包括诱导培养、转接培养、生根培养、纯化培养、扩大培养，其特征在于：所述诱导培养用培养基中含有甘露醇，所述甘露醇中含有L-甘露醇。
2.根据权利要求1所述的多倍体罗汉果植株的培育方法，其特征在于：所述甘露醇中含有6.4-7.8%的L-甘露醇。
3.根据权利要求1所述的多倍体罗汉果植株的培育方法，其特征在于：所述诱导培养的具体步骤为：选取取罗汉果雌株无菌试管苗茎尖，进行表皮细胞划伤处理，正面向上，平贴接种于MS诱导培养基中，在温度为24-26℃、光照强度为1500-2000Lux、光照时间为12-16h/d的条件下诱导培养8-15d，获得罗汉果丛芽，然后将丛芽用无菌水洗2-4次，备用。
4.根据权利要求1所述的多倍体罗汉果植株的培育方法，其特征在于：所述MS诱导培养基含有20-25g/L甘露醇、0.05-0.1mg/L吲哚丁酸、0.05-0.1mg/L细胞分裂素、0.05-0.1g/L秋水仙素。
5.根据权利要求1所述的多倍体罗汉果植株的培育方法，其特征在于：所述转接培养步骤为：将诱导培养得到的丛芽转接到含0.05-0.1mg/L吲哚丁酸、0.05-0.1mg/L细胞分裂素和15-30g/L蔗糖的MS转接液体培养基中，在温度为22-26℃、光照强度为1500-2000Lux、光照时间为12-16h/d的条件下转接培养25-30d，以产生苗形态变异，得到幼芽。
6.根据权利要求1所述的多倍体罗汉果植株的培育方法，其特征在于：所述生根培养步骤为：将转接培养得到的幼芽放入含0.05-0.1mg/L萘乙酸、0.05-0.1mg/L吲哚丁酸、10-20g/L蔗糖和4-5g/L琼脂的MS生根培养基中，在温度为22-26℃、光照强度为1500-2000Lux、光照时间为12-16h/d的条件下继代2-3次，获得完整的带根苗，进行染色体倍性鉴定，将鉴定合格的苗切成带腋芽的茎段，备用。
7.根据权利要求1所述的多倍体罗汉果植株的培育方法，其特征在于：所述纯化培养步骤为：将带腋芽的茎段接种于含0.03-0.08mg/L萘乙酸、0.05-0.1mg/L吲哚丁酸、0.1-0.2mg/L细胞分裂素、18-22mg/L光甾醇、10-20g/L蔗糖、23-29mg/L氨基葡萄糖和4-5g/L琼脂的MS纯化培养基中，在温度为22-26℃、光照强度为1500-2000Lux、光照时间为12-16h/d的条件下纯化2-3代，得到多倍体苗。
8.根据权利要求1所述的多倍体罗汉果植株的培育方法，其特征在于：所述扩大培养步骤为：将纯化培养得到的多倍体苗培养在含0.02-0.03mg/L萘乙酸、0.02-0.03mg/L吲哚丁酸、0.15-0.25mg/L细胞分裂素、20-30g/L蔗糖和4-5g/L琼脂的MS扩大液体培养基中，在温度为22-26℃、光照强度为1500-2000Lux、光照时间为12-16h/d的条件下扩繁培养25-30d，得到多倍体罗汉果雌株。
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