[发明专利]一种郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法在审
申请号: | 201810665452.X | 申请日: | 2018-06-26 |
公开(公告)号: | CN108753680A | 公开(公告)日: | 2018-11-06 |
发明(设计)人: | 尉倩;刘安成;李淑娟;柏国清;王庆;卢元 | 申请(专利权)人: | 陕西省西安植物园 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04 |
代理公司: | 西安嘉思特知识产权代理事务所(普通合伙) 61230 | 代理人: | 刘长春 |
地址: | 710061 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 忍冬 培养液 离体 花粉 花粉萌发 硼酸溶液 质量分数 培养箱 蔗糖 花粉活力测定 可重复性 离体保存 品种改良 新鲜花粉 萌发率 性繁殖 优选 采集 | ||
1.一种郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法, 其特征在于,将采集的郁香忍冬花粉分散在培养液中,置于培养箱中培养3h左右,培养温度设定为9~18℃;所述培养液的组分为质量分数15%~45%的蔗糖及浓度为100~300mg/L的硼酸溶液。
2.根据权利要求1所述的郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法, 其特征在于,所述郁香忍冬花粉的采集时间为上午9:00~10:00,选择当日散粉的郁香忍冬花朵。
3.根据权利要求1所述的郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法, 其特征在于,所述蔗糖溶液的质量分数为30%~45%。
4.根据权利要求3所述的郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法, 其特征在于,所述蔗糖溶液的质量分数为30%~35%。
5.根据权利要求1所述的郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法, 其特征在于,所述培养液中蔗糖质量分数为30%,硼酸浓度为100mg/L。
6.根据权利要求1所述的郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法, 其特征在于,所述培养温度设定为12℃。
7.根据权利要求1所述的郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法, 其特征在于,包括如下步骤:
1)花粉的收集和处理
于上午9:00~10:00选择当日散粉的郁香忍冬花朵,采集花粉,用毛刷轻刷已散粉的花粉囊,收集花粉;采集的新鲜花粉直接使用或贮存;
2)配制培养液
所述培养液的组分为质量分数为15%~45%的蔗糖及浓度为100~300mg/L的硼酸溶液;
3)在载玻片上滴加培养液,将花粉分散在培养液中,载玻片放入培养皿中,置于培养箱中培养3h左右,培养温度设定为9~18℃;
4)观察花粉萌发情况
用显微镜观察载玻片上花粉的萌发情况,随机选取3个视野,每个视野不少于50粒花粉,统计萌发的花粉数和视野内花粉粒总数;
5)计算花粉的萌发率
花粉萌发率(%)=萌发的花粉数/视野内花粉粒总数*100,计算3个视野的花粉萌发率,并取平均值。
8.根据权利要求7所述的郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法, 其特征在于,所述培养皿中铺有湿润滤纸,保持培养皿内环境湿润,以免培养液蒸发而引起浓度变化。
9.根据权利要求7所述的郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法, 其特征在于,所述观察花粉萌发情况是以花粉管长度超过花粉粒直径为萌发标准,每个视野不少于50粒花粉。
10.根据权利要求1或2或7所述的郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法, 其特征在于,所述郁香忍冬为其原亚种(
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