[发明专利]一种郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法

说明书

本发明属于植物有性繁殖技术领域，公开了一种郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法，其将采集的郁香忍冬花粉分散在培养液中，置于培养箱中培养3h左右，培养温度设定为9～18℃；所述培养液的组分包括质量分数为15%～45%的蔗糖和浓度为100～300mg/L的硼酸溶液。优选地，以质量分数30%的蔗糖+100 mg/L硼酸溶液作为离体花粉培养液，置于温度为12℃的培养箱中培养3h，郁香忍冬新鲜花粉的萌发率可达96.28%。本发明适用于郁香忍冬离体花粉活力测定，操作简便易行，可重复性高，数据准确可靠，能够为郁香忍冬花粉的离体保存、品种改良提供依据。

技术领域

本发明属于植物繁殖技术领域，涉及一种植物花粉的培养萌发方法，具体涉及一种郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法。

背景技术

郁香忍冬（Lonicera fragrantissima Lindl. et Paxt.），又名香忍冬，羊奶子，香吉利子，是忍冬科忍冬属的一种半常绿灌木，冬末春初先花后叶，花香浓郁，是北方早春季节重要的芳香类花木，观赏价值较高，郁香忍冬鲜叶中绿原酸含量较高，有重要的药用价值，其果实性状奇特，色泽艳丽，果味甜爽，营养丰富，具有较高的开发应用价值。郁香忍冬性状优良，是忍冬属植物杂交育种优秀的亲本材料，但由于其开花较早（花期2月中旬-3月初），与该属其他近缘种花期（4月-6月）不遇，限制了育种工作的开展。

花粉作为植物的雄配子体，在有性生殖中发挥着重要作用，在杂交育种工作中，为解决亲本花期不一致和远距离杂交的问题，需要保存有生活力的花粉，采集和贮存的花粉，使用之前必须进行生活力的鉴定，以估价花粉是否有授精能力。目前，对于郁香忍冬的研究主要集中于种质资源调查（郭现清.河南省郁香忍冬种质资源调查与开发利用研究[D].南京:南京林业大学,2006）、花蕾化学成分（刘华清等.郁香忍冬花蕾化学成分研究[J].中药材,2014,37(08):1383-1385）、扦插繁殖（赵迎春.三种花灌木的扦插繁殖技术研究[D].南京:南京农业大学,2010）等，对于花粉活力检测的方法还未见报道。

专利CN 201611121492.5记载了一种金银忍冬花粉超低温保存方法，将新鲜金银忍冬花粉从发育良好的母树上在开花当天13:30左右采集后装入1.8ml的冻存管中，即在采后初始含水量为13％～14％左右时将装有花粉的冻存管投入﹣196℃液氮罐中保存，随后采用自来水化冻5min的方式进行化冻。但本专利并没有涉及金银忍冬花粉的萌发培养技术。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法。本发明的技术方案弥补了郁香忍冬离体花粉萌发培养领域的技术空白，为其花粉活力的检测及新品种选育提供参考依据。同时，采用本发明所述郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法，可稳定、有效地检测郁香忍冬花粉活力，为杂交育种工作的开展提供了依据。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现：

一种郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法，其将采集的郁香忍冬花粉分散在培养液中，置于培养箱中培养3h左右，培养温度设定为9～18℃；所述培养液的组分包括质量分数为15%～45%的蔗糖和浓度为100～300mg/L的硼酸溶液。

作为所述方法的进一步优化，所述郁香忍冬花粉的采集时间为上午9:00～10:00，选择当日散粉的郁香忍冬花朵。

作为所述方法的进一步优化，所述蔗糖的质量分数为30%～45%。

作为所述方法的进一步优化，所述蔗糖的质量分数为30%～35%。

作为所述方法的进一步优化，所述蔗糖的质量分数为30%，硼酸浓度为100mg/L。

作为所述方法的进一步优化，所述培养温度设定为12℃。

在上述参数优化的基础上，所述的郁香忍冬离体花粉萌发的培养方法，其包括以下步骤：