[发明专利]一种用于DNA检测的信号放大系统、试剂盒和方法在审
申请号: | 201810666467.8 | 申请日: | 2018-06-26 |
公开(公告)号: | CN110643682A | 公开(公告)日: | 2020-01-03 |
发明(设计)人: | 周飞;冯先文;陈龙胜;付瑜 | 申请(专利权)人: | TDK株式会社 |
主分类号: | C12Q1/682 | 分类号: | C12Q1/682 |
代理公司: | 44202 广州三环专利商标代理有限公司 | 代理人: | 郝传鑫 |
地址: | 日本东京都*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核苷酸序列 放大物 初级信号 次级信号 互补配对 信号放大系统 核苷酸片段 终端信号 捕获探针 测试系统 放大系统 放大信号 信号转化 信号转换 测试 灵敏度 试剂盒 | ||
1.一种用于DNA检测的信号放大系统,其特征在于,包括捕获探针、初级信号放大物和次级信号放大物;所述捕获探针、初级信号放大物和次级信号放大物均为DNA片段;
所述捕获探针含有与DNA样品中待测DNA片段的部分核苷酸序列B1互补配对的DNA片段,所述部分核苷酸序列B1含有待测位点;
所述初级信号放大物包括第一中转物,所述第一中转物一端的核苷酸序列L1与DNA样品中待测DNA片段的部分核苷酸序列B2互补配对;所述第一中转物另一端的核苷酸序列L2含有m1个核苷酸片段L3;
所述次级信号放大物包括第一终端信号物,所述第一终端信号物含有核苷酸序列C1和核苷酸序列C2,核苷酸序列C2含有n1个与信号转换物的部分或全部DNA片段互补配对的核苷酸序列C3;
其中,所述核苷酸片段L3与所述核苷酸序列C1互补配对;m1和n1均为正整数,且m1和n1不能同时为1。
2.如权利要求1所述的用于DNA检测的信号放大系统,其特征在于,所述第一中转物的核苷酸序列L2的末端修饰有亲和物质M2;所述初级信号放大物还包括亲和物质M1和第二中转物;所述第二中转物含有m2个核苷酸片段L3,m2为正整数;所述第二中转物的5’末端和/或3’末端修饰有亲和物质M2;所述亲和物质M2与亲和物质M1之间具有亲和力;所述第一中转物和第二中转物通过亲和物质M2连接于亲和物质M1上。
3.如权利要求2所述的用于DNA检测的信号放大系统,其特征在于,所述第二中转物的核苷酸序列与所述第一中转物另一端的核苷酸序列L2相同。
4.如权利要求2或3所述的用于DNA检测的信号放大系统,其特征在于,所述亲和物质M1为氨基、聚赖氨酸、巯基、牛血清蛋白、亲和素、琼脂糖凝胶或聚丙烯酞胺胶。
5.如权利要求4所述的用于DNA检测的信号放大系统,其特征在于,所述亲和物质M1为链霉亲和素,所述亲和物质M2为生物素。
6.如权利要求1所述的用于DNA检测的信号放大系统,其特征在于,所述第一终端信号物的末端修饰有亲和物质M4;所述次级信号放大物还包括亲和物质M3和第二终端信号物,所述第二终端信号物含有n2个核苷酸序列C3,n2为正整数;所述第二终端信号物的5’末端和/或3’末端修饰有亲和物质M4;所述亲和物质M3与亲和物质M4之间具有亲和力;所述第一终端信号物和第二终端信号物通过亲和物质M4连接于所述亲和物质M3上。
7.如权利要求6所述的用于DNA检测的信号放大系统,其特征在于,所述第二终端信号物的核苷酸序列与所述第一终端信号物的核苷酸序列C2相同。
8.如权利要求6或7所述的用于DNA检测的信号放大系统,其特征在于,所述亲和物质M3为氨基、聚赖氨酸、巯基、牛血清蛋白、亲和素、琼脂糖凝胶或聚丙烯酞胺胶。
9.如权利要求8所述的用于DNA检测的信号放大系统,其特征在于,所述亲和物质M3为链霉亲和素,所述亲和物质M4为生物素。
10.如权利要求1所述的用于DNA检测的信号放大系统,其特征在于,所述m1=5,和/或所述n1=2。
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