[发明专利]一种用于DNA检测的信号放大系统、试剂盒和方法

说明书

本发明涉及一种用于DNA检测的信号放大系统、试剂盒和方法。本发明的信号放大系统包括捕获探针、初级信号放大物和次级信号放大物；初级信号放大物和次级信号放大物均为DNA片段；初级信号放大物包括第一中转物，第一中转物一端的核苷酸序列L₁与DNA样品中待测DNA片段的部分核苷酸序列B₂互补配对；第一中转物另一端的核苷酸序列L₂含有m₁个核苷酸片段L₃；次级信号放大物包括第一终端信号物，第一终端信号物含有核苷酸序列C₁和核苷酸序列C₂，核苷酸序列C₂含有n₁个与信号转换物的部分或全部DNA片段互补配对的核苷酸序列C₃；核苷酸片段L₃与核苷酸序列C₁互补配对。本发明在测试系统前增加了一套信号转化放大系统，在测试前就可放大信号，以此提高测试的灵敏度。

技术领域

本发明涉及一种信号放大系统、试剂盒和方法，具体涉及一种用于DNA检测的信号放大系统、试剂盒和方法。

背景技术

核酸检测主要有两种途径：(1)模板扩增技术，它通过扩增靶序列来提高敏感性；(2)信号放大系统，它通过放大信号强度来提高敏感性，它反应迅速，简便易行，没有模板扩增的干扰因素。

许多与疾病相关的生命物质(如特定蛋白质、酶、糖等分子或分子团，在疾病检测中称为标记物)在活体中的含量低不易被检测。因此，很多放大的方法被提出来以增加检测灵敏度。然而，现有的方法主要是针对测试系统中的放大效应，不存在前置的信号中转系统，同时其放大效率相对较低。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种用于DNA检测的信号放大系统、试剂盒和方法，采用该信号放大系统检测DNA时灵敏度更高。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种用于DNA检测的信号放大系统，其包括：捕获探针、初级信号放大物和次级信号放大物；所述捕获探针、初级信号放大物和次级信号放大物均为DNA片段；

所述捕获探针含有与DNA样品中待测DNA片段的部分核苷酸序列B₁互补配对的DNA片段，所述部分核苷酸B₁序列含有待测位点；

所述初级信号放大物包括第一中转物，所述第一中转物一端的核苷酸序列L₁与DNA样品中待测DNA片段的部分核苷酸序列B₂互补配对；所述第一中转物另一端的核苷酸序列L₂含有m₁个核苷酸片段L₃；

所述次级信号放大物包括第一终端信号物，所述第一终端信号物含有核苷酸序列C₁和核苷酸序列C₂，核苷酸序列C₂含有n₁个与信号转换物的部分或全部DNA片段互补配对的核苷酸序列C₃；

其中，所述核苷酸片段L₃与所述核苷酸序列C₁互补配对；m₁和n₁均为正整数，且m₁和n₁不能同时为1。

作为本发明所述用于DNA检测的信号放大系统的优选实施方式，所述第一中转物的核苷酸序列L₂的末端修饰有亲和物质M2；所述初级信号放大物还包括亲和物质M1和第二中转物；所述第二中转物含有m₂个核苷酸片段L₃，m₂为正整数；所述第二中转物的5’末端和/或3’末端修饰有亲和物质M2；所述亲和物质M2与亲和物质M1之间具有亲和力；所述第一中转物和第二中转物通过亲和物质M2连接于亲和物质M1上。