[发明专利]一种枯草芽孢杆菌及其应用、一种酶制剂

说明书

本发明公开了一种枯草芽孢杆菌，名称为枯草芽孢杆菌HU 528，保藏在广东省微生物菌种保藏中心，保藏日期为2018年4月23日，保藏编号为GDMCC NO：60364。本发明还公开了一种酶制剂，采用所述的枯草芽孢杆菌制备而成。本发明同时公开了上述枯草芽孢杆菌用于制备具有降血压活性的酵母酶解产物。采用本发明的枯草芽孢杆菌HU 528发酵制备的酶制剂具有蛋白酶和β‑葡聚糖酶活性，可用于破坏酵母细胞壁和水解酵母蛋白。本发明获得的酵母酶解产物具有较好的生物活性，经体内外活性测定，该酶解物组分至少具有降血压、抗氧化的活性，可作为高血压患者非药物治疗的食品，可用于有效预防、控制、缓解、辅助治疗高血压。

技术领域

本发明涉及食品生物技术领域，特别涉及一种枯草芽孢杆菌及其应用和一种酶制剂。

背景技术

非药物治疗是治疗和控制高血压的重要手段，以酵母为原料开发的降血压多肽产品有望成为高血压非药物治疗的安全、绿色功能性食品。采用市售的酵母抽提复合酶水解酵母粉，去除糖类和核酸物质后得到的多肽具有ACE抑制活性；进一步应用超滤膜分离和柱层析后获得了具有降血压活性较高的六肽。国外学者Mirzaei采用超声破壁辅助胰蛋白酶水解酵母制备了ACE抑制肽。

由于酵母细胞壁较厚，需要对酵母破壁以释放胞内蛋白质，采用单一蛋白酶水解酵母时，必须采用其它方法(如超声破壁)提取酵母蛋白。酵母抽提复合酶是用于生产酵母抽提物的混合酶，除了含有蛋白酶外，还含有能水解酵母细胞壁的β-葡聚糖酶和将蛋白质或多肽水解成氨基酸的外肽酶，虽然能同时进行酵母破壁和蛋白质水解，但是，外肽酶会将具有活性的多肽进一步水解成氨基酸。此外，不同蛋白酶作用于蛋白质的水解位点不同，水解酵母获得的多肽组成、大小和活性均不同。目前，还未有专用于水解酵母制备降血压活性多肽的酶制剂。

发明内容

为了克服现有技术的上述缺点与不足，本发明的目的在于提供一种枯草芽孢杆菌。

本发明的另一目的在于提供一种酶制剂。

本发明的再一目的在于提供上述枯草芽孢杆菌的应用，用上述枯草芽孢杆菌发酵生产的酶制剂水解食用酵母干粉，制备具有降血压活性的酵母酶解产物。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

一种枯草芽孢杆菌，名称为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HU 528，保藏在广东省微生物菌种保藏中心，保藏日期为2018年4月23日，保藏编号为GDMCC NO：60364，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所。

一种酶制剂，采用所述的枯草芽孢杆菌制备而成。

所述的酶制剂，其制备过程为：

将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HU528斜面菌种接种于LB培养基，接种于已灭菌的液体培养基，在温度为25～45℃，搅拌转速为150～250r/min的条件下发酵培养30～60h后，发酵上清液即为酶制剂。

所述酶制剂的蛋白酶活性为800U/mL～3000U/mL，β-葡聚糖酶活性为0.5 U/mL～3U/mL。

所述的枯草芽孢杆菌的应用，用于制备具有降血压活性的酵母酶解产物。

所述制备具有降血压活性的酵母酶解产物，包括制备所述酶制剂步骤和应用所述的酶制剂水解食用酵母粉两个步骤。

所述的液体培养基的配制方法为：在蒸馏水中加入胰蛋白胨0.5～2％w/w、葡萄糖0.1～1％w/w、CaCl₂ 0～0.3％w/w、NaCl0.1～0.3％w/w，混合均匀后，调节液体培养基pH为5.0～9.0。

所述酶水解食用酵母粉步骤具体为：