[发明专利]一种牙髓干细胞的分离培养方法有效
| 申请号： | 201810671349.6 | 申请日： | 2018-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN108795856B | 公开（公告）日： | 2020-07-03 |
| 发明（设计）人： | 李首一;石晓川 | 申请（专利权）人： | 吉林省太阳鸟再生医学工程有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 潘颖;赵青朵 |
| 地址： | 130012 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 牙髓 干细胞 分离 培养 方法 | ||
1.一种牙髓干细胞的分离培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
采用含有I型胶原酶、III型胶原酶和胰蛋白酶的溶液对牙髓组织进行消化，过筛，清洗后得到牙髓干细胞；
将牙髓干细胞接种至含有8～12ng/mL FGF、8％～12％FBS的DMEM/F12培养基进行细胞培养，每3天换液一次，当细胞汇合度为75％～85％时进行传代培养；
所述I型胶原酶的质量百分浓度为0.2％～0.4％，所述III型胶原酶的质量百分浓度为0.05％～0.15％，所述胰蛋白酶的质量百分浓度为0.05％～0.15％。
2.根据权利要求1所述的分离培养方法，其特征在于，所述I型胶原酶的质量百分浓度为0.3％，所述III型胶原酶的质量百分浓度为0.1％，所述胰蛋白酶的质量百分浓度为0.1％。
3.根据权利要求1所述的分离培养方法，其特征在于，所述I型胶原酶、所述III型胶原酶与所述胰蛋白酶的质量比为4:3:3～8:1:1。
4.根据权利要求1所述的分离培养方法，其特征在于，所述I型胶原酶、所述III型胶原酶与所述胰蛋白酶的质量比为3:1:1。
5.根据权利要求1所述的分离培养方法，其特征在于，所述过筛的孔径为60～80μm。
6.根据权利要求1所述的分离培养方法，其特征在于，所述牙髓组织为0.3～0.5mm3块状牙髓组织。
7.根据权利要求1所述的分离培养方法，其特征在于，所述消化的温度为36～38℃，转速为180～220r/min，消化的时间为10～20min。
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