[发明专利]一对用于鉴定宁麦9号及其衍生品种赤霉病抗性的引物及应用在审
| 申请号： | 201810672028.8 | 申请日： | 2018-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN108624711A | 公开（公告）日： | 2018-10-09 |
| 发明（设计）人： | 何漪;马鸿翔;张旭;姜朋;吴磊 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 杨文晰 |
| 地址： | 210014 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 赤霉病抗性 引物 小麦品种 衍生品种 琼脂糖凝胶电泳 核苷酸序列 小麦基因组 扩增产物 筛查 条带 应用 育种 直观 小麦 基因 | ||
【权利要求书】：
1.一对用于鉴定宁麦9号及其衍生品种赤霉病抗性的引物，其核苷酸序列分别如SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
2.如权利要求1所述引物在鉴定宁麦9号及其衍生品种赤霉病抗性中的应用。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，具体步骤如下：
分别以SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2为引物，以待测小麦基因组DNA为模板进行PCR扩增，并对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，若
扩增产物中含有800 bp大小的条带，则判定待测小麦为含有宁麦9号抗赤霉病基因的小麦，否则为感病小麦。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述PCT扩增体系如下：
20-100ng的待测小麦基因组DNA，5 U/μL的 Taq酶0.25μL，10 μmol/L的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2各1 μL，10 mmol/L的 dNTP 0.5 μL，10×PCR 的Mg2+ Plus缓冲液2.5 μL，以无菌蒸馏水补足至25 μL；
PCR扩增的反应条件为：94℃预变性5 min，随后94℃变性30 sec, 58℃条件下退火30sec, 72℃ 延伸40 sec，进行35个循环；最后72℃延伸5 min; 在4℃下保存。
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