[发明专利]一类保罗霉素衍生物及其制备方法与应用

权利要求书

1.结构式如式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯：

所述式I所示的化合物具体为palsimycin A、palsimycin B、palsimycin C或palsimycin D，其结构式如下所示：

2.权利要求1所述化合物的制备方法，包括下述步骤：

1)将Streptomyces paulus NRRL8115菌株在含N-乙酰半胱胺的液体培养基中进行发酵培养，收集发酵液；

2)将所述发酵液离心，收集上清液，将所述上清液用乙酸乙酯进行萃取，收集乙酸乙酯相进行干燥后浓缩，得粗提物；将所述粗提物用硅胶柱色谱进行分离纯化，其中所述硅胶柱色谱的洗脱液依次为：1倍柱体积的石油醚、1～1.5倍柱体积的石油醚和乙酸乙酯体积比1:1混合液、1～1.5倍柱体积的乙酸乙酯、1.5～2倍柱体积的乙酸乙酯和甲醇体积比1:1混合液、1倍柱体积的甲醇，收集用乙酸乙酯和甲醇体积比1:1混合液洗脱的洗脱组分并浓缩，得浓缩物；

将所述浓缩物通过C18反相填料柱色谱进行分离，其洗脱相依次为：水、1倍柱体积的体积分数为10％的乙腈-水溶液、1.5～2倍柱体积的体积分数为30％的乙腈-水溶液、1～1.5倍柱体积的体积分数为50％乙腈-水溶液，收集用体积分数为50％乙腈-水溶液洗脱的洗脱组分，除去有机相、干燥，得粗分离制品；

3)将所述粗分离制品以乙腈为溶剂，配制成溶液；然后利用反相高效液相色谱进行分离，以乙腈、含质量分数0.06％乙酸的水为流动相，所述乙腈、含质量分数0.06％乙酸的水按照体积比4:6进行等浓度梯度洗脱，依次收集保留时间为12.5～13.0min洗脱组分记为组分1，收集保留时间13.4～14.0min的洗脱组分记为组分2，收集保留时间17.2～17.9min的洗脱组分记为组分3，收集保留时间18.2～19.3min的洗脱组分记为组分4，收集保留时间21.0～21.8min的洗脱组分记为组分5，收集保留时间19.4～19.8min的洗脱组分记为组分6，收集保留时间20.2～20.8min的洗脱组分记为组分7，收集保留时间24.0～26.0min的洗脱组分记为组分8；

4)将所述组分3、组分4合并，利用反相高效液相色谱进行二次精制，以乙腈、含质量分数0.06％乙酸的水为流动相，以所述乙腈、含质量分数0.06％乙酸的水按照体积比43:57进行等浓度梯度洗脱，收集保留时间为12.0～13.0min的洗脱液；经浓缩、干燥得到所述palsimycin A；

将所述组分1、组分2合并，利用反相高效液相色谱进行二次精制，以乙腈、含质量分数0.06％乙酸的水为流动相，以所述乙腈、含质量分数0.06％乙酸的水按照如下时间程序中乙腈百分比进行梯度洗脱：0～3min,35％；3～8min,35％～40％；8～13min,40％～43％；13～20min,43％～50％；20～22min,50％～100％；22～24min,100％；24～26min,100％～50％；26～30min,50％～35％。收集保留时间为18.0～19.0min时的洗脱液；经浓缩、干燥得到所述palsimycin B；

将所述组分6、组分7合并，利用反相高效液相色谱进行二次精制，以乙腈、含质量分数0.06％乙酸的水为流动相，以所述乙腈、含质量分数0.06％乙酸的水按照体积比46:54进行等浓度梯度洗脱，收集保留时间为11.5～13.0min时的洗脱液；经浓缩、干燥得到所述palsimycin C；

将所述组分5利用反相高效液相色谱进行二次精制，以乙腈、含质量分数0.06％乙酸的水为流动相，以所述乙腈、含质量分数0.06％乙酸的水按照体积比57:43进行等浓度梯度洗脱，收集保留时间为7.3～7.9min时的洗脱液；经浓缩、干燥得到所述palsimycin D。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中，所述含N-乙酰半胱胺的液体培养基中N-乙酰半胱胺的体积分数为0.1％～0.2％；

所述发酵培养的条件为：在28℃培养36～48h；

所述Streptomyces paulus NRRL8115的接种量为2％～4％。