[发明专利]高纯度环孢菌素A及其制备方法在审
| 申请号： | 201810684846.X | 申请日： | 2018-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN108864257A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 傅立峰;诸敏;吴萍;高庆峰 | 申请（专利权）人： | 杭州中美华东制药有限公司 |
| 主分类号： | C07K7/64 | 分类号： | C07K7/64;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/16 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 310011 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 环孢菌素A 高纯度 粗品 制备 生产周期 发酵液过滤 结晶纯化 乙醇浸提 萃取分层 脱色 浓缩物 液处理 柱层析 萃取液 加碱 菌渣 溶媒 收率 浓缩 精品 | ||
1.一种环孢菌素A粗品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)、将环孢菌素A发酵液过滤，菌渣用乙醇解析，浓缩除去乙醇，得浓缩物；
(2)、浓缩物加碱液处理得处理液；
(3)、处理液用有机溶剂萃取，脱色，浓缩后结晶得环孢菌素A粗品。
2.如权利要求1所述的环孢菌素A粗品的制备方法，其特征在于：所得粗品纯度在90％以上。
3.如权利要求1所述的环孢菌素A粗品的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述碱液选自NaOH溶液、KOH溶液或Na2CO3溶液，优选NaOH溶液。
4.如权利要求1所述的环孢菌素A粗品的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述碱液浓度为0.5-1.5N，优选1N。
5.如权利要求1-4中任一项所述的环孢菌素A粗品的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述加碱液处理为加碱液至体系pH＝9.5～11.5，并于50～60℃水浴中搅拌2小时，优选60℃。
6.如权利要求1所述的环孢菌素A粗品的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述有机溶剂为乙酸乙酯，乙酸乙酯与处理液的体积比为3-4∶1。
7.如权利要求1所述的环孢菌素A粗品的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述脱色为，加入萃取液体积2-4％(W/V)的活性炭，搅拌2小时，过滤、洗涤得脱色液。
8.如权利要求1所述的环孢菌素A粗品的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述结晶的方法为，浓缩后的残留物中加入丙酮，残留物与丙酮的重量体积比为0.8-1.5∶1，-5℃至-18℃下放置结晶20小时以上。
9.如权利要求1所述的环孢菌素A粗品制备高纯度环孢菌素A的方法，其特征在于：环孢菌素A粗品经柱层析纯化，收集孢菌素A组分大于98.5％层析流份，浓缩，结晶得到纯度≥99.5％的环孢菌素A精品。
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