[发明专利]用于检测人免疫球蛋白基因重排的毛细管电泳试剂盒及其使用方法有效
申请号: | 201810685135.4 | 申请日: | 2018-06-28 |
公开(公告)号: | CN110656161B | 公开(公告)日: | 2022-12-13 |
发明(设计)人: | 陶慧卿;熊慧;谢立群;李云航;俞浩;杨建清 | 申请(专利权)人: | 苏州云泰生物医药科技有限公司;上海源奇生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京和信华成知识产权代理事务所(普通合伙) 11390 | 代理人: | 胡剑辉 |
地址: | 215130 江苏省苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 免疫球蛋白 基因 重排 毛细管 电泳 试剂盒 及其 使用方法 | ||
1.一种用于检测人免疫球蛋白基因重排的毛细管电泳检测试剂盒,其特征在于,所述毛细管电泳检测试剂盒包括核酸扩增试剂和对照品;
其中,所述核酸扩增试剂包括免疫球蛋白重链A PCR反应液、免疫球蛋白重链B PCR反应液、免疫球蛋白重链D PCR反应液、免疫球蛋白κ轻链A PCR反应液、免疫球蛋白κ轻链BPCR反应液、质控PCR反应液和DNA聚合酶液;
所述免疫球蛋白重链A PCR反应液中含有由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:30所示的引物组成的引物组合;
所述免疫球蛋白重链B PCR反应液中含有SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:30所示的引物组成的引物组合;
所述免疫球蛋白重链D PCR反应液中含有由SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:31所示的引物组成的引物组合;
所述免疫球蛋白κ轻链A PCR反应液中含有由SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ IDNO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:32和SEQ ID NO:33所示的引物组成的引物组合;
所述免疫球蛋白κ轻链B PCR反应液中含有由SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ IDNO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:34所示的引物组成的引物组合;
所述质控PCR反应液中含有由SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:38、SEQ ID NO:40、SEQ IDNO:42、SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:41所示的引物组成的引物组合;
其中SEQ ID NO:30~SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:41所示的引物为荧光引物,荧光引物的5’端标记有荧光基团;
所述DNA聚合酶液中含有DNA聚合酶;
所述对照品包括阳性对照1、阳性对照2和空白对照;阳性对照1中含有由分别包括SEQID NO:43、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46所示片段的质控质粒组成的质粒组合;所述阳性对照2中含有由分别包括SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:49、SEQ IDNO:50所示片段的质控质粒组成的质粒组合;所述空白对照为水。
2.根据权利要求1所述的毛细管电泳检测试剂盒,其特征在于,SEQ ID NO:30的5’端标记有FAM,SEQ ID NO:31的5’端标记有Tamara,SEQ ID NO:32的5’端标记有Hex,SEQ ID NO:33的5’端标记有Hex,SEQ ID NO:34的5’端标记有Tamara,SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:41的5’端均标记有Rox。
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