[发明专利]郁金指纹图谱的测定方法及其标准指纹图谱

权利要求书

1.一种郁金指纹图谱检测方法，其特征在于，所述方法包括气相指纹图谱方法及液相指纹图谱方法，

其中，气相指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：

(1)供试品溶液制备：取郁金药材1.5g，置1000ml烧瓶中，加水100ml及沸石数粒，加水使充满刻度部分并溢入烧瓶中为止.再加入正己烷2ml，连接回流装置，加热至沸并保持微沸3小时，放冷，分取正己烷层，置2ml量瓶中，挥发油提取器用少量正己烷洗涤，洗涤液并入同一量瓶中，加正己烷至刻度，摇匀，加入无水硫酸钠0.5g，摇匀，取上清液，即得；

(2)对照品溶液的制备：取β-榄香烯对照品加入加正己烷制成浓度已知的溶液，即得所述β-榄香烯对照品浓度为1mg/ml；

(3)测定方法：吸取对照品溶液与供试品溶液注入气相色谱仪，测定，并记录色图谱，用所得色谱图和标准郁金药材的气相指纹图谱进行对照，符合一致的为合格品；

其中，所述标准郁金药材的气相指纹图谱，制备方法如下：

取多批次经其他方法检测合格的郁金药材1.5g，每个批次分别用水蒸气蒸馏提取挥发油，所得挥发油加入2ml正己烷混合均匀，得到多批次样品；吸取所有批次上述样品注入气相色谱仪，测定，并记录色图谱，用指纹图谱软件对所得的图谱进行处理，获得郁金气相标准图谱；

其中，所述气相色谱系统条件如下：柱温为程序升温：初始温度为100℃，保持3分钟，以每分钟8℃的速率升温至200℃，保持10分钟，继以每分钟3℃的速率升温至240℃，保持20分钟；载气为氮气，分流进样，分流比1:1；所用的气相毛细管柱的型号为DB-624柱、TraceGOLDTG-624、或OV-1301，柱长为30m，内径为0.25mm，且氮气流速为1.1ml/min，进样口温度为240℃，检测器温度为260℃，

其中，液相指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：

(a)供试品溶液制备：

取5g温郁金药材粉末于烧瓶中，加入沸石数粒并以料液比1g：20mL加入纯化水，按挥发油提取方法，自测定器上端加水使充满刻度并溢入烧瓶为止，再加入2mL正己烷，连接回流装置，加热至沸并保持6小时，冷至室温后取正己烷层置5mL容量瓶，并用少量正己烷洗涤测定器洗涤液并入同一容量瓶，最后加正己烷定容，

(b)对照品溶液的制备：取莪术二酮对照品，加入无水乙醇制成浓度为0.3mg/ml，即得，

(c)测定方法：分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，记录色图谱，用所得色谱图和标准郁金药材的液相指纹图谱进行对照，符合一致的为合格品，

其中液相色谱系统条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，型号为4.6×150mm，5μm，柱温32℃；以甲醇为流动相A；水为流动相B，按照下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为220nm；流速为1.0ml/min，

时间，min	A，％	B，％
0～20	50→56	50→44
20～34	56	44
34～37	56→67	44→33
37～48	67→70	33→30
48～50	70→75	30→25
50～58	75→81	25→19
58～62	81	19
62～68	81→83	19→17
68～72	83→100	17→0
72～80	100	0

其中，所述标准郁金药材的液相指纹图谱，制备方法如下：

取多批次经其他方法检测合格的郁金药材1.5g，每个批次分别用水蒸气蒸馏提取挥发油，所得挥发油加入正己烷混合均匀至刻度，得到多批次样品；吸取所有批次上述样品注入液相色谱仪，测定，并记录色图谱，用指纹图谱软件对所得的图谱进行处理，获得郁金液相标准图谱。