[发明专利]产2;5-呋喃二甲酸重组基因工程菌的固定化及其应用在审
| 申请号： | 201810695487.8 | 申请日： | 2018-06-29 |
| 公开（公告）号： | CN109234217A | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 安徽瑞赛生化科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N11/02;C12P17/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 235058 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组基因工程菌 呋喃二甲酸 超分子自组装 大肠杆菌表达 固定化 构建 十六烷基三甲基溴化胺 甘油脱水酶基因 杆菌基因 模板固定 三氯化铝 重组DNA 硅酸钠 氯化铵 梭菌属 整合 修饰 制备 应用 基因 | ||
【权利要求书】：
1.本发明涉及产2,5-呋喃二甲酸重组基因工程菌的固定化及其应用，其特征在于超分子自组装模板固定产2,5-呋喃二甲酸重组基因工程菌。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于将硅酸钠、十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)、氯化铵和三氯化铝在水相和超分子自组装条件下，制备的孔径为20～35nm的超大比表面积（不小于1000m2/g）的超分子自组装模板,并在酸性水溶液中结构稳定,合成物体系中各物质的摩尔比为SiO2:CTAB:AlCl3:NH4Cl：H2O=1.0:0.15～0.2:0.5～0.6:1.0～2.0:40～60。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于重组基因工程菌的构建方法如下：
（1）将梭菌属甘油脱水酶基因gldABC，整合进土生克雷伯杆菌基因dhaβ,形成重组DNA基因gldha；
（2）通过PCR扩增，并经修饰后插入大肠杆菌表达载体pTE28aT7,构建2,5-呋喃二甲酸工程菌pTE28aT7-gldha。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于将上述超分子自组装模板，采用物理吸附法来固定上述重组基因工程菌，并用于在含果糖限制性培养基中发酵制备2,5-呋喃二甲酸，发酵工艺条件为温度31℃～37℃、110r/min振荡培养48h，固定化酶可以反复使用30次以上。
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