[发明专利]一种通过贝壳灰度值分析长牡蛎免疫能力强弱的方法

说明书

本发明公开了一种通过贝壳灰度值分析长牡蛎免疫能力强弱的方法，首先通过筛选多个关键免疫相关指标，并建立了壳色灰度值与关键免疫指标的相关性关系；其次，利用综合评价法评估分析长牡蛎壳色对于免疫指标的影响，从而确定了一种通过测定贝壳灰度值评估活体长牡蛎免疫力的方法，本发明的方法可在不影响牡蛎存活率的情况下，根据壳色灰度值来大体了解长牡蛎个体的免疫能力强弱情况，选取免疫力较强的个体用于育种，可提高个体抗逆性，提高养殖效率。

技术领域

本发明涉及长牡蛎免疫能力分析技术领域，具体涉及一种通过贝壳灰度值分析长牡蛎免疫能力强弱的方法。

背景技术

近年来，随着海洋环境的变化，海洋水产养殖业的快速发展，很多贝类不能适应目前的环境，造成贝类生长缓慢甚至在养殖区面临大面积死亡现象，对养殖业的可持续发展有严重影响。养殖贝类大面积死亡发生的原因则有可能是养殖环境中物理条件的变化(如温度、pH、有机和重金属污染等)和化学条件变化影响到机体的免疫防御体系，表现为一些重要的生理生化指标的变化，从而使得外界病原可以入侵机体发生感染，或者原来携带的病原得以大量繁殖，从而引起机体生长缓慢，甚至造成死亡。牡蛎等养殖贝类属于无脊椎动物软体动物门，其体内不具备特异性免疫系统，没有特异性免疫淋巴细胞、抗体、免疫球蛋白，仅具有血细胞介导的较为完善的非特异免疫系统，包括体液免疫和细胞免疫。现有技术中报道过许多与之免疫相关的指标，比如体液免疫因子主要包括溶酶体酶、抗氧化物酶、抗氧化因子、酚氧化酶(酪氨酸酶)、髓性过氧化物酶(MPO)、凝集素、调理素、抗菌肽、应激蛋白和细胞因子类似物等，其体内的溶酶体酶和抗氧化防御系统在免疫防御中起着至关重要的作用(杜丽，张巍，陆逵，等.贝类免疫机制研究进展[J].动物医学进展，2008，29(3)：77-81)。酪氨酸酶作为酚氧化酶的其中一类，是黑色素合成的关键酶。随着对天然黑色素的深入研究发现，黑色素的某些生理功能与类胡萝卜素类似，具有清除体内自由基、抗菌、抗氧化等免疫能力，无脊椎动物中黑色素具有抗菌活性，黑色素沉淀可防止血淋巴丢失，并促进伤口愈合，对机体起到保护作用(Kim Y.J.，and Uyama H.，2005，Tyrosinase inhibitorsfrom natural and synthetic sources：structure，inhibition mechanism andperspective for the future，CellularMolecular Life Sciences Cmls，62(15)：1707-1723)，不同文献中关于免疫影响因素的报道一般是基于一种因子，但是免疫系统是一个非常复杂的体系，影响因子众多，单纯的一个因子评价不能综合反映其整体情况。

并且，以往评价双壳贝类的免疫能力主要进行组织和血淋巴的免疫指标测定，而组织和血淋巴免疫指标的测定需要打开双壳贝类的壳进行取样，开壳会导致贝类的死亡。

发明内容

本发明的目的在于提供一种通过贝壳灰度值分析长牡蛎免疫能力强弱的方法，该方法可在不影响牡蛎存活率的情况下，根据壳色灰度值来大致了解长牡蛎个体的免疫能力强弱，用以解决现有技术中开壳对其造成损伤的问题。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种通过贝壳灰度值分析长牡蛎免疫能力强弱的方法，所述方法是通过测定贝壳的灰度值来直接反应长牡蛎的免疫能力强弱，具体两者之间的关系为：

其中，所述灰度值调节范围是0～2.4，0代表全白，2.4代表全黑；免疫能力从弱到强分为4个等级，分别为1级、2级、3级、4级。

具体地，得出贝壳的灰度值与长牡蛎免疫能力强弱关系方法如下：

(1)选择与长牡蛎免疫能力相关的六个免疫指标，分别为TYR、MPV、IHR、ROS、LZM、T-AOC；

(2)选取不同壳色的长牡蛎，分别对其壳色及各免疫指标进行测定；

(3)然后采用层次分析法分析并分别得出各免疫指标的主观权重；