[发明专利]一种养殖废水中氟喹诺酮类兽药抗生素样品前处理装置及含量测定方法

说明书

本发明公开了一种养殖废水中氟喹诺酮类兽药抗生素样品前处理及含量测定的方法，属于水环境中微量有机物分析与检测技术领域。其包括过滤净化柱串联固相萃取柱的养殖废水前处理装置，含量测定方法包括前处理、富集、洗脱和HPLC‑MS/MS检测，可检测养殖废水中氟喹诺酮类兽药抗生素。本发明使用过滤净化柱串联固相萃取柱，去除基质中对氟喹诺酮类兽药抗生素测定结果有干扰的物质，简化了前处理过程。使用自装填式过滤净化柱，自行填装过滤填料，柱体可反复使用，节约了经济成本。建立了对养殖废水中氟喹诺酮类兽药抗生素样品含量测定的方法，在短时间内对多种氟喹诺酮类兽药抗生素进行快速的分离检测，具有可操作性强、高效的优点。

技术领域

本发明涉及水环境中微量有机物分析与检测技术领域，具体涉及一种用于养殖废水中氟喹诺酮类兽药抗生素的样品前处理及含量测定方法。

背景技术

目前，兽药抗生素在全球范围内广泛应用于治疗动物疾病和促进动物健康生长。随着畜禽业集约化养殖的发展，兽药抗生素被大量滥用。动物对抗生素的吸收有限，大约75％的抗生素以原药或代谢物的形式通过粪便和尿液排出体外。很多研究结果表明，养殖场排放的污水中含有大量的兽药抗生素残留，养殖废水是环境水体中抗生素的重要来源。

氟喹诺酮类兽药是喹诺酮类药物的第三代产品，抗菌谱更为扩大，抗菌作用强，而且价格适中，因此被广泛地应用到食源性动物的饲养过程中。但其在食源性动物中的滥用和和使用不当现象也很严重，通过食物链进入人体导致人体内病原体的耐药性，并且某些氟喹诺酮类药物具有潜在的致癌性。我国已制定相关检测标准，中国及CAC(国际)、欧盟、美国、日本等国家和组织都将氟喹诺酮类药物列入禁止使用的兽药名单中，并制定出相关的最高残留限量(MRL)。

近年来，国内外对氟喹诺酮类兽药抗生素的研究日趋重视，关于其在环境中残留检测的研究得以发展。目前，主要的测定方法有微生物法、免疫分析法、色谱分析法三大类，色谱分析法中主要有高效液相色谱法、液相质谱联用法、高效毛细管电泳分析法以及高效薄层色谱法。固相萃取(SPE)串联液相色谱-质谱法(HPLC-MS/MS)具有应用范围广、灵敏度高、分析速度快等特点，成为微量有机物前处理和测定的重要方法之一。应用SPE-HPLC-MS/MS测定废水中氟喹诺酮类兽药抗生素多采用外标法定量，内标法检测的报道较少。

中国专利公开号CN106370748A公开了有机肥中氟喹诺酮类药物的测定方法及其样品预处理方法，中国专利公开号CN105929047A公开了一种同时测定畜禽养殖废水中磺胺类、四环素类、大环内酯类抗生素的测定方法，但对于养殖废水中氟喹诺酮类兽药抗生素的测定方法没有相关报道。

相较其他环境水体，养殖废水中氟喹诺酮类兽药抗生素浓度较高，并且养殖废水成分复杂且基质干扰严重，对测定结果影响较大，直接用养殖废水作为样品进行氟喹诺酮类兽药的测定目前还没有适用的方法，因此有必要建立养殖废水中氟喹诺酮类兽药抗生素样品前处理及含量测定方法，可用于实际养殖废水的检测。

发明内容

本发明的目的在于提供一种养殖废水中氟喹诺酮类兽药抗生素样品前处理及含量测定的方法。该前处理方法能够快速、高效地完成养殖废水样品的净化过滤，从而提高样品前处理的效率。本发明所述的养殖废水前处理装置的结构简单，投入成本少。此外，本发明所述的养殖废水前处理装置能够大幅度减少有机溶剂的使用量。

本发明的技术方案如下：

一种养殖废水中氟喹诺酮类兽药抗生素含量测定方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取养殖废水水样，通过玻璃纤维滤纸过滤，用硫酸溶液和氢氧化钠溶液调节pH值至3.0；

(2)向养殖废水水样中加入回收率指示剂和金属离子耦合剂Na₂-EDTA，振荡使其充分混匀；

(3)向养殖废水水样中加入内标物质诺氟沙星-D⁵，使其混合均匀；