[发明专利]一种BSA-EGCG-TPS纳米颗粒的制备方法

权利要求书

1.一种BSA-EGCG-TPS纳米颗粒的制备方法，其特征是包括如下步骤：

(1)制备茶多糖：取绿茶粉末制备得到粗茶多糖，再经过聚酰胺柱色谱纯化，超滤，得到分子量为30～80KDa的茶多糖，所述茶多糖简称TPS；

(2)按比例，将40～55mL的乙醇滴入15～25mL浓度为1.5～2.5mg/mL的牛血清白蛋白水溶液，所述牛血清白蛋白简称BSA，20～30℃，搅拌10～20min；再滴入0.75～1.5mL戊二醛，20～30℃，搅拌45～75min；在21100×g离心10～20min，用去离子水洗涤沉淀2～4次，将沉淀重新悬浮到18～25mL水中，得到BSA纳米颗粒悬浮液；

(3)将15～25mL浓度为0.75～1.5mg/mL的表没食子儿茶素没食子酸酯水溶液，滴入到8～12mL BSA纳米颗粒悬浮液中，20～30℃，搅拌20～40min，得到BSA-EGCG纳米颗粒悬浮液，所述表没食子儿茶素没食子酸酯简称EGCG，所述BSA-EGCG纳米颗粒悬浮液简称BEN悬浮液；

(4)将步骤(1)获得的茶多糖加水配成浓度为1～2.5mg/mL茶多糖水溶液，取5mL滴入到15～25mL BEN悬浮液中，20～30℃，搅拌20～40min，在21100×g条件下离心10～20min，用去离子水洗涤沉淀2～4次，冻干，得到BSA-EGCG-TPS纳米颗粒，所述BSA-EGCG-TPS纳米颗粒简称BETN。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤(1)为：制备茶多糖：取绿茶粉末，用相当于绿茶粉末质量4～6倍的体积浓度为75％～85％的乙醇水溶液浸提20～28h，过滤，残渣干燥，用相当于残渣质量15～25倍的90～100℃水浸提残渣1.5～2.5h，过滤，浸提2～4次，合并水提滤液，浓缩至合并水提滤液体积的1/10～1/5得浓缩液，加入相当于浓缩液体积4倍的体积浓度为95％乙醇水溶液，沉淀，4℃，放置8～12h，离心，固体冻干，得到粗茶多糖；再经聚酰胺柱色谱纯化，超滤，得到分子量为30～80KDa的茶多糖，所述茶多糖简称TPS。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤(2)为：将50mL的乙醇滴入20mL浓度为2mg/mL的牛血清白蛋白水溶液，所述牛血清白蛋白简称BSA，25℃，搅拌15min；再滴入1mL戊二醛，25℃，搅拌60min；在21100×g离心15min，用去离子水洗涤沉淀3次，将沉淀重新悬浮到20mL水中，得到BSA纳米颗粒悬浮液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤(3)为：将20mL浓度为1mg/mL的表没食子儿茶素没食子酸酯水溶液，滴入到10mL BSA纳米颗粒悬浮液中，25℃，搅拌30min，得到BSA-EGCG纳米颗粒悬浮液，所述表没食子儿茶素没食子酸酯简称EGCG，所述BSA-EGCG纳米颗粒悬浮液简称BEN悬浮液。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤(4)为：将步骤(1)获得的茶多糖加水配成浓度为2mg/mL茶多糖水溶液，取5mL滴入到20mL BEN悬浮液中，25℃，搅拌30min，在21100×g条件下离心15min，用去离子水洗涤沉淀3次，冻干，得到BSA-EGCG-TPS纳米颗粒，所述BSA-EGCG-TPS纳米颗粒简称BETN。

6.权利要求1-5之一的方法制备的BSA-EGCG-TPS纳米颗粒。