[发明专利]一种BSA-EGCG-TPS纳米颗粒的制备方法

说明书

本发明公开了一种BSA‑EGCG‑TPS纳米颗粒的制备方法，包括如下步骤：将BSA溶于水中，制备BSA水溶液，将无水乙醇逐滴滴入BSA溶液中，搅拌，静置，逐滴滴入戊二醛，搅拌，离心，水洗涤沉淀，将沉淀重新悬浮到水中，得到BSA纳米颗粒悬浮液；将EGCG溶于水中制备EGCG水溶液，并逐滴滴入到BSA纳米颗粒悬浮液中，搅拌，得到BSA‑EGCG纳米颗粒悬浮液；将茶多糖TPS溶于水中，制备茶多糖水溶液，并逐滴滴入到BSA‑EGCG纳米颗粒悬浮液中，搅拌，离心，水洗，冻干，得到BSA‑EGCG‑TPS纳米颗粒BETN。制备过程简便，无毒，安全，得到的纳米颗粒稳定性高，抗氧化活性好。

技术领域

本发明涉及一种BSA-EGCG-TPS纳米颗粒的制备方法，属于纳米颗粒技术应用领域。

背景技术

EGCG即表没食子儿茶素没食子酸酯，是绿茶茶多酚中的主要组成成分，是一种黄烷醇-3-醇。EGCG具有抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病等多种作用。然而，EGCG在人体内的吸收率低于5％，口服后低于1％；而且，EGCG非常容易被氧化。稳定性差、生物利用度低和毒性大的缺点限制了EGCG的充分利用。茶多糖是茶叶中的另一重要活性成分，也是一种潜在功能性食品。

BSA即牛血清白蛋白，具有无毒、非免疫原性、低成本、生物相容性好和生物可降解性的特点，它可以在药物传递系统中作为多功能蛋白载体。此外，BSA还可以将不同疏水性或不稳定的大分子或小分子药物转运到靶位点。

目前，纳米技术在许多领域特别是医学和生物技术领域的应用越来越受到人们的关注。纳米的概念已经从1纳米到100纳米扩展到1纳米到1000纳米。纳米技术已被应用于包括癌症在内的多种疾病的诊断和治疗。高溶解度、超小体积、可生物降解、毒副作用低、高稳定性、靶向性和高效性等是纳米颗粒的优点。近些年来，蛋白-多糖复合纳米颗粒在食品、保健、医药等领域越来越受欢迎，特别是作为小分子多酚的包封载体。蛋白质、多糖和多酚之间会相互作用，其相互作用力主要是非共价键，主要包括氢键、疏水作用力、亲水作用力和范德华力。蛋白质-多酚-多糖复合物因其在开发新的多功能食品材料和药物传递系统方面的巨大潜力而备受关注。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种BSA-EGCG-TPS纳米颗粒的制备方法。

本发明的第二个目的是提供一种BSA-EGCG-TPS纳米颗粒。

本发明的技术方案概述如下：

一种BSA-EGCG-TPS纳米颗粒的制备方法，包括如下步骤：

(1)制备茶多糖：取绿茶粉末制备得到粗茶多糖，再经过聚酰胺柱色谱纯化，超滤，得到分子量为30～80KDa的茶多糖，所述茶多糖简称TPS；

(2)按比例，将40～55mL的乙醇滴入15～25mL浓度为1.5～2.5mg/mL的牛血清白蛋白水溶液，所述牛血清白蛋白简称BSA，20～30℃，搅拌10～20min；再滴入0.75～1.5mL戊二醛，20～30℃，搅拌45～75min；在21100×g离心10～20min，用去离子水洗涤沉淀2～4次，将沉淀重新悬浮到18～25mL水中，得到BSA纳米颗粒悬浮液；

(3)将15～25mL浓度为0.75～1.5mg/mL的表没食子儿茶素没食子酸酯水溶液，滴入到8～12mL BSA纳米颗粒悬浮液中，20～30℃，搅拌20～40min，得到BSA-EGCG纳米颗粒悬浮液，所述表没食子儿茶素没食子酸酯简称EGCG，所述BSA-EGCG纳米颗粒悬浮液简称BEN悬浮液；

(4)将步骤(1)获得的茶多糖加水配成浓度为1～2.5mg/mL茶多糖水溶液，取5mL滴入到15～25mL BEN悬浮液中，20～30℃，搅拌20～40min，在21100×g条件下离心10～20min，用去离子水洗涤沉淀2～4次，冻干，得到BSA-EGCG-TPS纳米颗粒，所述BSA-EGCG-TPS纳米颗粒简称BETN。