[发明专利]一种白藤梨根抗肿瘤活性物质的筛选及提取方法在审

专利信息
申请号: 201810708508.5 申请日: 2018-07-02
公开(公告)号: CN108896500A 公开(公告)日: 2018-11-27
发明(设计)人: 张家敏;张骋 申请(专利权)人: 张家敏;张骋;金华市人民医院
主分类号: G01N21/31 分类号: G01N21/31;A61K36/185;A61P35/00
代理公司: 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 代理人: 吴佩
地址: 321000 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 白藤梨根 药渣 抗肿瘤活性物质 石油醚提取物 乙醇提取物 乙酸乙酯 渗漉法 渗漉液 提取物 溶剂 烘干 制备 体外抗肿瘤实验 乙酸乙酯提取物 预处理 筛选 石油醚浸泡 提取液分离 提取液过滤 超声提取 过滤浓缩 活性评价 药材烘干 乙醇浸泡 制备乙酸 肿瘤细胞 乙醇 量取 药筛 乙酯 浸泡 浓缩 检测
【说明书】:

发明是一种白藤梨根抗肿瘤活性物质的筛选及提取方法。本发明包括:⑴预处理:取白藤梨根药材烘干后粉碎,过药筛得到颗粒均匀的粉末;⑵制备石油醚提取物:取白藤梨根粉末,量取石油醚浸泡白藤梨根粉末,超声提取后将白藤梨根药渣与提取液分离,提取液过滤浓缩,得到石油醚提取物;⑶制备乙酸乙酯提取物:将步骤⑵中的白藤梨根药渣烘干后置于乙酸乙酯中浸泡,再用乙酸乙酯为溶剂采用渗漉法提取,药渣待用,渗漉液减压浓缩,得到乙酸乙酯提取物;⑷制备乙醇提取物:将步骤⑶中的白藤梨根药渣烘干,加入乙醇浸泡再用乙醇为溶剂采用渗漉法提取,渗漉液过滤浓缩,得到乙醇提取物;⑸活性评价:体外抗肿瘤实验检测三种提取物对肿瘤细胞活性的影响。

技术领域

本发明涉及中药材中活性物质筛选与提取技术领域,特别是一种白藤梨根抗肿瘤活性物质的筛选及提取方法。

背景技术

随着社会及经济的发展,生产环境及生活方式的改变,恶性肿瘤成为威胁人类健康的主要疾病之一。自20世纪70年代以来中国恶性肿瘤发病率和死亡率呈持续增长趋势,在肝癌、食道,胃、肺等恶性肿瘤中,中国新增病例和死亡人数均居世界首位。

近些年大量临床及实验数据表明中医中药在肿瘤患者的治疗过程中有其独到的作用,已经成为肿瘤综合治疗的重要组成部分。中药在改善肿瘤患者临床症状,提高患者生存质量,防止肿瘤复发转移,以及与化疗配合增效减毒等方面都有很好的疗效。但是,中药所含的化学成分十分复杂,既含有效成分,也有无效成分,日常煎煮服用也不方便。中药提取就是利用一些技术最大限度提取其中有效成份,使得中药制剂的内在质量和临床治疗效果提高,使中药的效果得以最大限度的发挥。提取中药中的有效成分并进一步加以分离、纯化,得到有效单体是当前中药研究领域中的一项重要内容。从中草药中提取出抗肿瘤的有效活性成分,已成为抗肿瘤药物开发的重要来源。

毛花猕猴桃(Actinidia eriantha Benth),即我们俗称的白藤梨,是猕猴桃科猕猴桃属植物,广泛分布于浙江、福建、江西、广西及广东。白藤梨根是毛花猕猴桃的干燥根,性寒、味苦涩,具有清热、利湿、活血消肿、解毒等功效,为畲族民间治疗肿瘤的习用药材,广泛地用于抗肿瘤的治疗。但是长久以来白藤梨根抗肿瘤的有效活性部位并不明确,导致其有效活性成分的提取也缺乏针对性。现有的提取工艺一般采用水或乙醇为溶剂进行回流提取,得到水提物或醇提物;或者用95%乙醇浸渍提取,提取完后再用75%乙醇浸渍提取,合并提取液,得到乙醇总提取物,再用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇等极性不同的溶剂萃取,最后得到不同的有效成分。热提取方法对药材中热不稳定的有效成分来说,容易造成破坏或结构改变,而且水提液或醇提液溶剂回收困难,不易保存或运输。此外,萃取工艺比较繁杂,在萃取过程中不同极性溶剂萃取不够充分,二氯甲烷萃取还易产生乳化等现象,操作费时,不适合工业化生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种白藤梨根中有效活动物质的筛选及提取方法。

本发明采用的技术方案是通过如下方式完成的:一种白藤梨根抗肿瘤活性物质的筛选方法,该白藤梨根抗肿瘤活性物质的筛选方法包括以下步骤:

⑴预处理:取一定量的白藤梨根药材,烘干后高速粉碎机粉碎,过药筛得到颗粒均匀的白藤梨根粉末;

⑵制备石油醚提取物:称取适量白藤梨根粉末,量取一定体积的石油醚浸泡白藤梨根粉末,超声提取后将白藤梨根药渣与提取液分离,提取液用滤纸过滤后,用旋转蒸发仪减压浓缩,得到石油醚提取物;

⑶制备乙酸乙酯提取物:将步骤⑵中超声提取后的白藤梨根药渣在烘箱中烘干,挥干残余的溶剂,烘干后的药渣置于一定体积的乙酸乙酯中浸泡,浸泡后的白藤梨根药渣用乙酸乙酯为溶剂采用渗漉法提取,药渣待用,渗漉液用滤纸过滤后在旋转蒸发仪中减压浓缩,得到乙酸乙酯提取物;

⑷制备乙醇提取物:将步骤⑶中渗漉提取后的白藤梨根药渣经烘箱烘干溶剂,加入一定体积的乙醇浸泡,浸泡后的白藤梨根药渣用乙醇为溶剂采用渗漉法提取,渗漉液用滤纸过滤后在旋转蒸发仪中减压浓缩,得到乙醇提取物;

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