[发明专利]人造皮肤的制造方法及人造皮肤

权利要求书

1.一种人造皮肤的制造方法，包括以下步骤：

通过对成纤维细胞及胶原蛋白进行混合而形成仿真皮层；

在所述仿真皮层上应用角质形成细胞后进行培养；

在第一培养基中培养所述仿真皮层，所述第一培养基为角质形成细胞培养基；及

将在所述第一培养基中培养的仿真皮层在混合DMEM培养基及F12培养基而成的第二培养基中进行培养。

2.根据权利要求1所述的人造皮肤的制造方法，其中，

所述角质形成细胞包括黑色素形成细胞的干细胞。

3.根据权利要求2所述的人造皮肤的制造方法，其中，

所述第二培养基包括用于诱导所述黑色素形成细胞的干细胞分化的成分。

4.根据权利要求1所述的人造皮肤的制造方法，其中，

将所述第一培养基设置为与所述仿真皮层的底面相接，并且使与设置有所述第一培养基的表面相反的表面暴露在空气中。

5.根据权利要求1所述的人造皮肤的制造方法，其中，

在结束所述第一培养基中的培养步骤后直接进行所述第二培养基中的培养步骤。

6.根据权利要求1所述的人造皮肤的制造方法，其中，

在所述第一培养基中的培养期和在所述第二培养基中的培养期合计为20天内。

7.根据权利要求6所述的人造皮肤的制造方法，其中，

在所述第一培养基中的培养期等于或长于在所述第二培养基中的培养期。

8.根据权利要求1所述的人造皮肤的制造方法，其中，

所述第二培养基通过以1:1至4:1的比例混合所述DMEM培养基和所述F12培养基而成。

9.根据权利要求1所述的人造皮肤的制造方法，其中，

所述第二培养基进一步包括选自氢化可的松(hydrocortisone)、三碘甲状腺原氨酸(Triiodothyronine)、霍乱毒素(Cholera toxin)、抗坏血酸(ascorbic acid)及氯化钙(CaCl₂)中的一种或两种以上。

10.根据权利要求1所述的人造皮肤的制造方法，其中，

所述第二培养基中的培养步骤在暴露在空气中的状态下进行。

11.一种人造皮肤，包括仿真皮层及位于所述仿真皮层上的仿表皮层，其中，

所述仿表皮层包括与所述仿真皮层相邻的表皮基底层部分及暴露在空气中的角质层部分，

存在于所述角质层中的角质形成细胞和存在于所述表皮基底层中的黑色素形成细胞来自同一个人。

12.一种色素化调节剂的功效评价方法，包括以下步骤：

在根据权利要求1至10中的任一项所述的方法制造的人造皮肤中或在根据权利要求11所述的人造皮肤中应用所述色素化调节剂；及

对应用所述色素化调节剂的人造皮肤的色素沉着程度和未应用所述色素化调节剂的人造皮肤的色素沉着程度进行比较。

13.根据权利要求12所述的色素化调节剂的功效评价方法，其中，

所述色素化调节剂通过与所述人造皮肤直接接触来应用。