[发明专利]HMGB1检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种HMGB1检测试剂盒，其特征在于，包括试剂1和试剂2；所述试剂1包括HMGB1抗体标记的胶乳微球、助悬剂、牛血清白蛋白和第一缓冲液；

所述试剂2包括氯化钠、分散剂、表面活性剂和第二缓冲液。

2.根据权利要求1所述的HMGB1检测试剂盒，其特征在于，所述试剂1包括以下终浓度的组分：60μg/mL～120μg/mL HMGB1抗体、0.1v/v％～0.15v/v％胶乳微球、30g/L～60g/L助悬剂、5g/L～20g/L牛血清白蛋白和40mM/mL～60mM/mL第一缓冲液，所述试剂1的pH值为7～8。

3.根据权利要求1所述的HMGB1检测试剂盒，其特征在于，所述胶乳微球为表面活化的聚苯乙烯胶乳微球，所述聚苯乙烯胶乳微球的表面活化基团为羧基，所述胶乳微球的颗粒直径为20nm～50nm。

4.根据权利要求1所述的HMGB1检测试剂盒，其特征在于，所述助悬剂选自海藻糖、葡萄糖、乳糖和蔗糖中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的HMGB1检测试剂盒，其特征在于，所述第一缓冲液选自PB缓冲液、MES缓冲液、Tris-HCl缓冲液和甘氨酸缓冲液中的至少一种。

6.根据权利要求1～5任一所述的HMGB1检测试剂盒，其特征在于，所述试剂2包括以下终浓度的组分：5g/L～9g/L氯化钠、5g/L～10g/L分散剂、0.2g/L～0.8g/L表面活性剂和40mM/mL～60mM/mL第二缓冲液，所述试剂2的pH值为7～8。

7.根据权利要求6所述的HMGB1检测试剂盒，其特征在于，所述试剂1和所述试剂2的用量体积比为1:(1～3)。

8.权利要求1～7任一所述的HMGB1检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括所述试剂1的制备步骤和所述试剂2的制备步骤；

其中，所述试剂1的制备步骤包括以下步骤：

将所述助悬剂、所述牛血清白蛋白、所述第一缓冲液和所述HMGB1抗体标记的胶乳微球混合，并超声悬浮，得超声悬浮液；

将所述超声悬浮液进行紫外灭菌、无菌封装，得到所述试剂1；

所述试剂2的制备步骤：

将所述试剂2的各组分混合均匀，得到所述试剂2。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述试剂1的制备步骤还包括所述HMGB1抗体标记的胶乳微球的制备，包括如下步骤：

取胶乳微球加入到缓冲液中，然后加入表面活性剂和活化剂，活化所述胶乳微球，制成混合液A；所述活化剂为羧基活化剂或氨基活化剂；

往所述混合液A中加入HMGB1抗体，进行偶联标记反应，制成含HMGB1抗体标记的胶乳微球的溶液B；

往所述溶液B中加入封闭液，封闭反应完成后，进行离心，所得沉淀即为所述HMGB1抗体标记的胶乳微球。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述试剂1的制备方法中的所述表面活性剂选自TritonX-100、吐温-20和脂肪酸甲酯磺酸钠中的至少一种。