[发明专利]大目金枪鱼副产物中鱼油的提取方法及其EPA的纯化方法

权利要求书

1.大目金枪鱼副产物中鱼油的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

A、粗鱼油提取：将大目金枪鱼副产物捣碎后加水调节料液比，调节pH，加入胰蛋白酶酶解，待酶解反应结束后灭酶，离心分离油脂，得到粗鱼油，即A品；

B、粗鱼油乙酯化：将A品置于容器中水浴加热，加入NaOH/MeOH溶液，混合后振荡摇匀，在搅拌下冷凝回流，皂化完全后冷却至室温，静置分层，回收上层油相，旋转蒸发除去多余乙醇，用饱和NaCl洗涤至下层洗涤液清澈透明，取上相脱水，得到脂肪酸乙酯产品，即B品；

C、分子蒸馏：将B品加入分子蒸馏设备的进料器进行蒸馏，再将一级蒸馏产物重新加入进料器，进行多级蒸馏分离，得C品；

D、尿素包合：向C品中加入饱和尿素溶液，混合均匀，在加热条件下反应，反应后停止加热，冷藏低温结晶后抽滤，滤液旋转蒸发，水洗，脱水得到高含量乙酯型鱼油成品。

2.根据权利要求1所述的大目金枪鱼副产物中鱼油的提取方法，其特征在于：步骤A中，所述料液比为1:5，所述pH调至8.5，所述胰蛋白酶的加入量为大目金枪鱼副产物的2％，所述酶解反应的温度为45℃，所述酶解反应的时间为3h，所述离心分离的速度为6000rpm，所述离心分离的时间为15min。

3.根据权利要求1所述的大目金枪鱼副产物中鱼油的提取方法，其特征在于：步骤B中，所述水浴加热至70℃，所述NaOH/MeOH溶液的浓度为2mol/L，所述A品与NaOH/MeOH溶液的质量份数比为2:1，所述饱和NaCl洗涤液与油相的体积比为3:1，所述脱水在真空条件下进行。

4.根据权利要求1所述的大目金枪鱼副产物中鱼油的提取方法，其特征在于：步骤C中，所述蒸馏设备，设置预脱气温度为60℃，蒸馏刮板转速250r/min，冷却温度5℃。

5.根据权利要求1所述的大目金枪鱼副产物中鱼油的提取方法，其特征在于：步骤C中，所述多级蒸馏的压力为4-6Pa，所述多级蒸馏的温度为150-160℃。

6.根据权利要求1所述的大目金枪鱼副产物中鱼油的提取方法，其特征在于：步骤C中，所述多级蒸馏为三级蒸馏，各级的蒸馏压力分别为4Pa、5Pa、6Pa，各级蒸馏的温度为150℃、155℃、160℃。

7.根据权利要求1所述的大目金枪鱼副产物中鱼油的提取方法，其特征在于：步骤D中，所述饱和尿素溶液以95％的乙醇为溶剂于65℃水浴下搅拌配制，所述C品和饱和尿素溶液的质量份数比为1:1.5，所述反应时间为0.5h，所述水洗次数为2-3次，所述脱水在真空条件下进行。

8.根据权利要求1-7任一权利要求所述的大目金枪鱼副产物中鱼油的提取方法，所述EPA的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

E、精馏：向塔釜中加入高含量乙酯型鱼油成品，打开低温恒温槽和真空泵，检查系统气密性后将塔釜加热，待塔顶出现回流时，维持全回流并保持系统稳定，打开回流比控制器，收集馏出物，得E品；

F、银离子材料螯合：制备银硫醇硅胶作固定相，将玻璃层析柱垂直固定，将固定相与正己烷混悬液倒入玻璃层析柱内，半开底部活塞使流动相流出；敲打玻璃层析柱柱体使固定相沉积紧密，并在固定相顶部覆盖石英砂，将E品溶于正己烷中，关闭活塞将样品缓慢加入石英砂表面，打开底部活塞使流动相流出，待样品完全进入石英砂床层后，在玻璃层析柱顶部加恒压漏斗，漏斗内加入丙酮-正己烷流动相，控制流动相的流出速度进行洗脱，回收丙酮-正己烷，得EPA单体成品。

9.根据权利要求8所述EPA的纯化方法，其特征在于：步骤E中，所述塔釜加热至150℃。

10.根据权利要求8所述EPA的纯化方法，其特征在于：步骤F中，银硫醇硅胶的制备方法为，将活化硅胶，按每克活化硅胶10ml邻二甲苯的量将活化硅胶投入盛有邻二甲苯的容器中，充分搅拌后加入巯丙基三甲氧基硅烷偶联剂和正丁胺，每克活化硅胶加入0.5ml巯丙基三甲氧基硅烷偶联剂和0.5ml正丁胺，加热至150℃，反应24h，冷却、过滤得到巯丙基硅胶，洗涤后于干燥箱内60℃干燥16h，以每克硝酸银40ml甲醇溶液的量溶解硝酸银，加入巯丙基硅胶反应1.5-2.5h，所述硝酸银与巯丙基硅胶的质量比为1:4，反应完后取沉淀洗涤干燥得到银硫醇硅胶；所述固定相与正己烷混悬液的质量比为1:4；按每克E品1ml正己烷的量将E品溶解于溶解于正己烷；所述丙酮-正己烷的质量分数为0.5％；洗脱时所述流动相的流出速度为1-1.2mL/min。