[发明专利]无刺花椒组织培养初代诱导的方法有效
申请号: | 201810730081.9 | 申请日: | 2018-07-05 |
公开(公告)号: | CN108496804B | 公开(公告)日: | 2019-05-24 |
发明(设计)人: | 陈泽雄;唐宁;娄娟;李哲馨;刘奕清 | 申请(专利权)人: | 重庆文理学院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人: | 武君 |
地址: | 402160 重庆市*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 花椒 组织培养 外植体 诱导 外植体消毒 诱导培养基 技术体系 接种方式 有效抑制 诱导培养 种苗繁殖 重要意义 内生菌 接种 消毒 优化 | ||
1.无刺花椒组织培养初代诱导的方法,其特征在于,包括如下步骤:取外植体,外植体消毒,接种和诱导培养;所述外植体消毒为将枝条剪成带2-3个芽的小段并去掉浸泡到水中变黑的组织,选取靠近顶芽的2-3处茎段作为培养材料;消毒前加入3-5滴吐温-80,再加入体积分数2%的次氯酸钠溶液消毒,盖住盖子后持续振荡消毒3-4min,无菌水清洗4-5次后置于消毒好的接种盘备用;
所述接种为采用将茎段的上端插入到培养基中,腋芽浸没于培养基,茎段下端暴露在培养基表面外,培养基配方为添加 0 mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA、2.0mg/L ZT、0.1 mg/L植物抑菌剂、6g/L卡拉胶和30 g/L蔗糖的MS培养基;
所述诱导培养为接种后置于光照培养室暗培养3d后,开灯光照培养为12 h /d,培养温度为25±2℃,7-10d后,筛除真菌、细菌污染及褐化,对无污染、无褐化进行转代培养,将茎段的下端插入到培养基中,更换培养基至出芽。
2.根据权利要求1所述无刺花椒组织培养初代诱导的方法,其特征在于:所述取外植体的取材季节为春季,取材时间选择连续晴3天及以上的午后,选择具有母本典型性状、无病虫害的健壮无刺花椒植株为对象,剪取当年新萌发的嫩梢,腋芽尚未萌动的枝条。
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