[发明专利]一种红根野蚕豆组培快繁新方法

权利要求书

1.一种红根野蚕豆组培快繁新方法，其特征在于以下步骤和方法进行的：

(1)外植体的选择：将健壮植株，栽植于实验室内，每隔3天用75％多菌灵500倍液喷施5次以上，选取幼嫩带芽茎段；

(2)外植体的清洁消毒：将选取的外植体剪成带芽小段后用饱和肥皂水溶液涮洗后冲淋，在超净工作台上依次用酒精、漂白粉溶液及升汞溶液消毒；

(3)丛生芽诱导培养：将消毒好的外植体，去掉两端切至0.5-1.0cm带芽茎段，接种在以1/2WPM或1/4MS为基本培养基，添加NAA、6-BA、ZT、硝酸银、活性炭的诱导培养基上，在一定温度、光照强度和光周期环境下培养；

(4)丛生芽增殖培养：将诱导出的丛生芽剪成单芽，接种在以1/2WPM或1/4MS为基本培养基，添加6-BA、KT、马铃薯、香蕉、活性炭的增殖培养基上，在一定温度、光照强度和光周期的环境下培养；

(5)丛生芽生根培养：将增殖的无根苗，接种在以1/2WPM为基本培养基，添加NAA、IBA、烯效唑、活性炭和马铃薯的生根培养基上，在一定温度、光照强度和光周期的环境下培养；

其中，

步骤(2)中所述的外植体的最佳消毒方法为75％酒精消毒10-25s，饱和漂白粉溶液消毒20-30min，0.05％升汞溶液消毒7-8min；

步骤(3)中所述的丛生芽诱导培养基为1/2WPM或1/4MS+NAA 0.02-0.1mg/L+6-BA 0.5-2.0mg/L+ZT 0.01-0.1mg/L+活性炭0.5-1.0g/L，培养环境为温度25±2℃，光照强度1000-2000lux，单日光照时间为培养前15天为6h，15天后为12h的条件下培养；所述步骤(3)的培养基添加有糖25-30g/L，琼脂4.5-5g/L，PH值5.8-6.0；

步骤(4)中所述的丛生芽增殖培养基为1/2WPM或1/4MS+6-BA 1.0-2.0mg/L+KT 2.0-4.0mg/L+硝酸银1.0μg/L+马铃薯50-80g/L+香蕉40-60g/L+活性炭0.5-1.0g/L，培养环境为温度25±2℃，光照强度3000-4000lux，单日光照时间为12h的条件下培养；所述步骤(4)的培养基添加有糖25-30g/L，琼脂4.5-5g/L，PH值5.8-6.0；

步骤(5)中所述的丛生芽生根培养基为1/2WPM+NAA 0.5-2.0mg/L+IBA 0.5-2.0mg/L+烯效唑0.01-0.1mg/L+马铃薯30-50g/L+活性炭0.5-1.0g/L，培养环境为温度25±2℃，光照强度3000-4000lux，单日光照时间为12h的环境下培养；所述步骤(5)的培养基添加有糖25-30g/L，琼脂4.5-5g/L，PH值5.8-6.0。

2.根据权利要求1所述的一种红根野蚕豆组培快繁新方法，其特征在于步骤(1)所述的幼嫩带芽茎段为顶端健壮无病虫害植株顶端10-20cm，剪成2-3cm带芽茎段。