[发明专利]一种快速提取基因组DNA的方法在审
申请号: | 201810737847.6 | 申请日: | 2018-07-06 |
公开(公告)号: | CN108456678A | 公开(公告)日: | 2018-08-28 |
发明(设计)人: | 江勇;林心建;林正凤 | 申请(专利权)人: | 大连元和健路医学检验实验室有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人: | 刘慧娟;李馨 |
地址: | 116000 辽宁省大*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分子筛 柱子 基因组DNA 快速提取 柱身 支架 工业化应用 核酸提取 样品细胞 仪器设备 托盘 抽提物 固定式 混合液 膜非 托住 破碎 封闭 | ||
1.一种快速提取基因组DNA的方法,其特征在于:所述方法包括使用下述分子筛柱子的步骤:
所述的分子筛柱子包括柱身和DNA分离膜;所述柱身底部设置有用于托住DNA分离膜的支架和封闭底部的托盘;所述的DNA分离膜具有便于溶液在重力的作用下自由流动的孔隙;所述DNA分离膜非固定式的放置在支架上,所述DNA分离膜和柱身存在间隙;
使用上述分子筛柱子快速提取基因组DNA的方法步骤包括:
①破碎样品细胞,然后加入1/3-1/2体积的异丙醇,混合均匀获得DNA的抽提物混合液;
②将上述分子筛柱子底部的托盘向上推,使底部封闭,置于收集管或离心管中;然后将DNA的抽提物混合液加至上述DNA分离膜上,停留2-5分钟,絮状的基因组DNA和DNA分离膜特异性的结合;
③打开底部托盘,没有吸附的生物大分子溶液流到收集管或离心管中,DNA分离膜再经过清洗液后,取出分子筛柱子,倒置;
④用外力将DNA分离膜脱落到新的收集管或离心管里,再使用洗脱液将DNA分离膜上的DNA溶解、收集即得样品的基因组DNA。
2.根据权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法,其特征在于:所述的破碎样品细胞通过使用DNA裂解液,或含有蛋白酶k的裂解液进行。
3.根据权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法,其特征在于:所述洗脱溶液的主要成分为异丙醇或乙醇。
4.根据权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法,其特征在于:在所述分子筛柱子的柱身顶部还设置有上部边框;在上部边框上还设置有分子筛柱子的柱身把手。
5.根据权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法,其特征在于:在上述分子筛柱子的柱身底部还设置有分子筛柱子底部托盘;在所述底部托盘上还设置有把手。
6.根据权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法,其特征在于:所述的DNA分离膜带有孔隙为直径0.5-2.5毫米的小孔,或带有缝隙宽度为0.5-2.5毫米的“v”型槽。
7.根据权利要求6所述的快速提取基因组DNA的方法,其特征在于:所述小孔是均匀排布在DNA分离膜上,数量为5~100个。
8.根据权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法,其特征在于:所述DNA分离膜的材质为硅烷化的硝酸纤维材料,或硅烷化的聚酯酰胺纤维,或硅烷化的聚芳酰胺纤维,或玻璃纤维材料。
9.根据权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法,其特征在于:所述DNA分离膜片的直径略小于柱身的内径1mm左右。
10.根据权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法,其特征在于:所述的柱身为圆筒形,所述圆筒形的柱身尺寸高5-12mm,直径6-8mm。
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