[发明专利]一种快速提取基因组DNA的方法

说明书

本发明公开了一种能够快速提取基因组DNA的方法，所述方法包括使用下述分子筛柱子的步骤：所述的分子筛柱子包括柱身和设置在柱身底部用于托住DNA分离膜的支架和封闭底部的托盘；所述DNA分离膜非固定式的放置在支架上，所述DNA分离膜和柱身存在间隙，使用上述分子筛柱子快速提取基因组DNA的方法步骤包括：破碎样品细胞，获得DNA的抽提物混合液；以及利用上述分子筛柱子更加方便高效的获得基因组DNA的步骤，采用本发明的分子筛柱子进行的核酸提取方法，其操作简便，不需要复杂的仪器设备，成本低，DNA产量高，质量好，具有良好的工业化应用前景。

技术领域

本发明涉及分离、制备或纯化DNA的技术领域，具体涉及一种快速提取基因组DNA的方法。

背景技术

关于基因组DNA的提取方法很多，大致有以下几种类型：1)沉淀法；2)硅胶膜微型柱法；3)硅胶层析柱法；4)磁珠法。他们的共同之处是前期对样品的处理过程，用裂解液将细胞破碎，核DNA被释放出来，经过蛋白酶k降解绝大部分的蛋白质(蛋白酶k处理的目的是进一步提高所提取的DNA纯度，对纯度要求不严格的样品，这一步可以省略)。在不同的提取方法中，后续的方法差异较大。

1)沉淀法，样品中加入异丙醇或其他的有机试剂，和相应的高盐成分，使得DNA亲水结构发生改变，成棉絮状析出，经过离心沉淀DNA，复溶于TE或其他的缓冲溶液。

2)硅胶膜微型柱法，裂解样品加入到硅胶膜微型柱，DNA特异性地吸附于硅胶膜上，经过离心或抽真空法，去掉裂解液和没有吸附的其他物质，利用清洗液进一步洗脱其他的杂质，最后加入洗脱液，让DNA和硅胶膜分离，收集纯化的DNA。

3)硅胶层析柱法，将硅胶基质填充在层析柱中，让样品裂解液通过柱子，DNA特异性地吸附在硅胶上，用清洗液进一步洗脱其他的杂质，最后用洗脱液让DNA和柱子分离，收集纯化的DNA；

4)磁珠法，和其他的几种方法相比较，磁珠法出现得比较晚，磁珠法的主要技术特点是将硅胶和磁性颗粒结合，形成硅胶磁珠(里面是磁珠，外面是硅胶)。外层的硅胶可以和样品裂解液中的DNA在疏水条件下特异性地结合，里层的磁珠可以在吸铁石或电磁力产生的磁场中移动，在固定的区域集合，和其他的没有吸附/附着的非DNA杂质溶液分开，从而可以很方便地进行清洗没有结合的物质，最后用DNA洗脱液，使DNA的疏水性发生变化，和硅胶分离，收集纯化的DNA。磁珠法可以容易的实现自动化操作。

以上四种方法各有利弊，第一和第三种方法的DNA产物的产量较高，但是操作复杂，成本较高，适合在科研实验室做少量样品的处理，第二种方法的操作成本高，步骤繁琐，核酸DNA的产量不高，但是质量可靠，比较适合实验室使用，第四种方法能在自动核酸提取仪上应用，能实现批量化的核酸提取，缺点是DNA产量低，成本高。因此，亟待开发一种能够快速提取基因组DNA的方法以及其配套使用的新型分子筛柱子，使核酸提取技术能满足以下要求：1)容易规模化生产、2)可以实现批量化生产、3)能得到高产量高品质的基因组DNA、4)操作步骤简单和操作时间短、和5)成本低。

现有技术中，经典的Qiagen方法使用的基因组DNA提取试剂盒(产品编号51104)的生产成本较高，在使用过程中存在耗时长，且需要微量高速离心机或真空泵等配套设备，存在使用不够便利的问题。

发明内容

为了解决上述问题，本发明公开了一种能够快速提取基因组DNA的方法，所述方法包括使用下述分子筛柱子的步骤：

所述的分子筛柱子包括柱身和DNA分离膜；所述柱身底部设置有用于托住DNA分离膜的支架和封闭底部的托盘；其中，所述的DNA分离膜的支架，其可以采用X字形，也可以采用其他各种框形，只要起到托住DNA分离膜的作用即可，例如，采用类似图2的式样也可以。